应面法优化曲霉产多糖培养基的研究.docx

应面法优化曲霉产多糖培养基的研究应面法优化曲霉产多糖培养基的研究一、本课题研究现状及可行性分析本课题研究现状：多糖具有各种生理活性，活性多糖的保健功能是目前保健食品功能因子中研究焦点之一。活性多糖作为一类有前途的天然药物，在预防和治疗肿瘤、艾滋病等顽症上已显示出诱人的前景，但目前能够用于临床的多糖药物并不多，近年来,有大量有关糖保健功能的研究报道，主要集中在多糖的促进免疫、抗肿瘤、抗病毒等方面。另外，多糖来具有降血糖、降血脂、抗肿瘤、阻抗放射性元素和毒素的吸收等作用。从真菌中寻找新型药物已为世界瞩目，这是一个亟待开发的自然宝库，对生命科学、医药科学的研究与开发具有重要意义。在了解真菌多糖化学结构、组成成分和生物活性的基础上，提高多糖产量具有现实意义。本研究采用响应面法对曲霉产多糖培养基进行优化，为多糖产量提高和后继发酵放大试验研究奠定基础。可行性分析：实验所需条件和仪器具备：电热恒温培养箱、电热恒温鼓风干燥箱、超净作台、立式压力蒸汽灭菌锅、CCS45恒箱培养摇床、水浴锅、721分光光度计、电子天平、pH计、烧杯、锥形瓶、培养皿等，实验药品满足，本课题的研究方案已经设计完毕。二、本课题研究的关键问题及解决问题的思路1、研究的关键问题本课题研究的关键问题主要是确定影响曲霉产多糖培养基中的主要因素，确定因素水平以及响应值的测定，利用响应面法分析结果分析结果。2、解决问题的.思路曲霉由本院微生物实验室筛选获得，先将曲霉接种于种子培养基（PDA液体培养基）培养一段时间后接种于发酵培养基，待发酵完成后，测多糖含量，本实验所用方法是苯酚硫酸法和3,5-二硝基水杨酸比色法（DNS法）。苯酚硫酸法测得的是总糖量，DNS法测得的是还原糖量，多糖量=总糖量-还原糖量。苯酚易氧化，见光或空气逐渐变成淡红色，因此测定时尽可能避光且操作迅速。苯酚在水中溶解度较小，故需限制苯酚用量，否则会生成乳白色沉淀或针状结晶而干扰测定。采用Plackeet-Burman法对发酵培养基中碳源、氮源、无机盐、磷酸盐几种主要营养成分影响曲霉产多糖量的多少进行优化。最后分析结果。三、论文纲要（一）概述：简要介绍关于多糖保健作用的情况。（二）材料与方法：1．曲霉2．培养基制备3.培养条件4．糖含量测定5．响应面法优化实验（三）结果与分析1．碳源的选择2．氮源的选择3.无机盐的选择4.磷酸盐的选择5.响应面法优化培养基（四）讨论四、主要参考文献[1]赵玉萍，朱春等.田口设计优化曲霉产多糖培养基.食品科技，2011，36（7）：16-19[2]乔均俭，王世英，郝粉霞等.响应面法优化黑曲霉产果胶培养基中无机盐成分的研究.生物数学学报，2010,25(3):508-514[3]刘伟雄.游离果胶酶和固定化果胶酶酶学性质.[J]食品研究与开发，2001，22（4）:5-7[4]ZhouX,ZhengY,etal.Fermentationmediumoptimizationofthemophilicproteinasebyresponsesurfacemethodology[J]JournalofBiomathematics,2007,22(1):113-118[5]杜国军，刘晓兰，郑喜群.产果胶酶黑曲霉发酵条件的优化[J].农业与技术，2008,28（5）：83-85[6]牛广才，朱丹，李志江.响应面法优化桑黄菌产胞外多糖液体发酵培养基的研究[J]生物数学学报，2009,24（3）:523-530[7]张双凤，林香娟，于村.苯酚—硫酸法测定胖大海凉茶中多糖的研究.河南预防医学杂志，2000,11（3）：144-145