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本发明提供了一株分泌甲硝唑单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用,本发明的杂交瘤细胞株,已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所,分类命名为单克隆细胞株,保藏日期2021年05月13日,保藏编号CGMCCNo.22330。本发明所述免疫抗原制备的单克隆抗体灵敏度高,以MNZ?GA耦合载体蛋白制备的完全抗原为包被抗原,抗体在ic?Elisa中的IC50值为0.075ng/mL。本发明所提供的甲硝唑半抗原,以及所述甲硝唑抗原在抗体制备和甲硝唑药物残留分析检测应用方面具有十分重要的意义和重大价值。