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本发明公开了一种梭梭离体再生的方法,包括:待梭梭无菌苗长至3~5cm时,截取0.5~1cm子叶节迅速接种至诱导愈伤激素培养基中,接种14d后陆续出愈;待无菌苗长至3~5cm时,截取约0.5~1cm大小的子叶节迅速地接种至诱导出芽培养基中,接种14d后陆续出芽;待不定芽生长至1~2cm时,将不定芽转接至含有植物激素的诱导生根培养基中,接种14d后陆续生根;将根系发达、健壮的再生幼苗在人工气候箱内打开瓶口,炼苗一周左右,再从培养瓶中取出再生苗,用无菌水冲洗附着在根表面的培养基,移栽至灭菌种植基质中,置于设定培养条件的培养室中培养。本发明愈伤组织出愈率达100%、出芽率61.90%、出芽指数为2.90、生根率为50%,且生根快。