树莓离体再生培养的方法.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN115968778A(43)申请公布日2023.04.18(21)申请号202211281871.6(22)申请日2022.10.19(71)申请人北京大学现代农业研究院地址261000山东省潍坊市峡山生态经济开发区怡峡街197号6号楼(72)发明人周军会唐雅君(74)专利代理机构北京康信知识产权代理有限责任公司11240专利代理师金田蕴(51)Int.Cl.A01H4/00(2006.01)A01H6/74(2018.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称树莓离体再生培养的方法(57)摘要本发明公开了一种树莓离体再生培养的方法。该方法包括以下步骤：选择茎干半木质化的树莓植株，取休眠的腋芽作为外植体材料；将休眠的腋芽进行消毒处理；剥去消毒后的休眠的腋芽的外表皮鳞片组织，切去芽底部，留下2～5mm的芽尖端；将芽尖端接种于增殖培养基中进行光照增殖培养；将光照增殖培养后的芽尖端移入生根培养基进行光照生根培养，得到组培树莓苗。本发明的树莓再生方法具有广谱性，在不同的树莓品种上均可高效离体再生培养，且发芽率高，培养周期短，可作为树莓资源在农业上使用，具有广泛的应用价值和推广价值。CN115968778ACN115968778A权利要求书1/1页1.一种树莓离体再生培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：选择茎干半木质化的树莓植株，取休眠的腋芽作为外植体材料；将所述休眠的腋芽进行消毒处理；剥去消毒后的所述休眠的腋芽的外表皮鳞片组织，切去芽底部，留下2～5mm的芽尖端；将所述芽尖端接种于增殖培养基中进行光照增殖培养；将光照增殖培养后的所述芽尖端移入生根培养基进行光照生根培养，得到组培树莓苗。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：将所述组培树莓苗进行炼苗移栽的步骤。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述炼苗移栽包括将所述组培树莓苗放置于温室大棚中练苗5～10天，然后将所述组培树莓苗移栽至大田中生长；优选的，所述温室大棚中的温度为22～25℃，湿度为60～70％，光照强度为6～10klux。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述消毒处理包括：用所述休眠的腋芽放入75％乙醇溶液消毒处理5～10s，用无菌水洗2‑3次；接着用30％次氯酸钠消毒10～15min,无菌水冲洗至少6遍。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述增殖培养基包括4.43g/LMS培养基、3.5g/LPhytagel、20g/L蔗糖、0.5～0.8mg/L6‑BA、0.1～0.3mg/LTDZ和0.1～0.3mg/LNAA，pH＝5.8。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述增殖培养基包括4.43g/LMS培养基、3.5g/LPhytagel、20g/L蔗糖、0.6mg/L6‑BA、0.2mg/LTDZ和0.1mg/LNAA，pH＝5.8。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养基包括4.43g/LMS、3.5g/LPhytagel、20g/Lsucrose和0.1mg/LIBA，pH＝5.8。8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述增殖培养的温度为22～25℃，光照强度为6～10klux，光周期为14h/10h。9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生根培养的温度为22～25℃，光照强度为6～10klux，光周期为14h/10h。10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述树莓植株的品种为波尔卡、哈瑞太兹、苏蜜特、波鲁特、黑树莓或秋福。2CN115968778A说明书1/5页树莓离体再生培养的方法技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种树莓离体再生培养的方法。背景技术[0002]树莓，又名覆盆子，蔷薇科(Rosaceae)悬钩子属(RubusL.)多年生开花植物，其广泛分布在欧洲、亚洲、北美洲等的温带气候区，并且自公元4世纪便被作为食物和药物使用。时至今日，树莓已经成为一种具有较高经济价值的全球性果树种类，且近年消费需求仍不断增长。这与树莓独特的风味、极高的营养、保健和药用潜力紧密相关，其富含花青素、鞣花酸、维生素和γ‑氨基丁酸等健康因子，且树莓果实超氧化物歧化酶(SOD)含量居各类水果之首，具有抗氧化、抗肿瘤、抑菌抗炎、调节免疫、降低血液胆固醇等药用功效。树莓，属于我国药食同源植物，具有极高的营养和保健价值，1993年被FAO评为“第三代果树”。[0003]树莓果实除用于鲜食外，还被用于制药、保健品、化妆品等生产领域。同时，还被加工成果酱、果汁、果酒、蜜饯等食品。目前我国已有部分地区或企业涉及了树莓深加工领域，如黑龙江省尚志市已经建成浓缩汁、果酱、果酒等系列产品生产线，其产品果酒、果酱畅销国内外，