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本发明涉及一种具有调节肠道菌群功能的猴头菇多糖的制备方法,包括如下步骤:猴头菇子实体在烘箱干燥后粉碎、过筛得到猴头菇粉;猴头菇粉经乙醇浸提脱脂,离心去除上清液;脱脂猴头菇粉按照一定料液比加入去离子水,90℃?100℃热水浸提次数1?3次,每次1?4h,然后离心取上清液;上清液加入一定体积的95%乙醇,获得一定浓度的乙醇?水猴头菇溶液;室温静置12?48h,取下层沉淀加入纯水复溶,经过旋蒸、透析和旋蒸后,脱除有机溶剂,经冷冻干燥,制得猴头菇多糖。该制备方法得到的猴头菇多糖,在体外胃肠道模拟消化中表现出不易被口腔、胃液、小肠液降解,而可以直达大肠,在大肠中被肠道菌群降解利用;而且有益于肠道中双歧杆菌属丰度上升。