高压冷冻及冷冻替代制备透射电子显微镜样品的方法.pdf

高压冷冻及冷冻替代制备透射电子显微镜样品的方法,涉及透射电子显微镜生物样品的制备技术。步骤:1)采集生物组织或细胞样品;2)组织切成小块或细胞离心沉淀后,在高压冷冻仪中进行高压冷冻固定;3)将样品转入冷冻替代仪中,在低温下进行醋酸双氧铀溶液固定和丙酮脱水;4)在冷冻替代仪中,进行乙醇冲洗和HM20树脂渗透与包埋,紫外光下低温聚合。可广泛应用于源于动物、植物和酵母等生物的组织或细胞样品。避免传统常温化学固定对样品结构产生的影响,最大限度保证样品结构特征,做到最真实地反映样品特性。最大限度地保护蛋白免疫原特性,使所得到的样品可进一步被抗体标记,极大地方便后期蛋白标记的实验开展。