一种将离体肾脏组织解离成单细胞悬液的方法.pdf
黛娥****ak
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一种将离体肾脏组织解离成单细胞悬液的方法.pdf
本发明公开了一种将离体肾脏组织解离成单细胞悬液的方法,主要是通过酶I和酶II两次消化处理后,结合过滤、离心清洗以及红细胞裂解等操作获得纯化后的单细胞悬液。所述酶I为含0.25%胰蛋白酶的HBSS培养基;所述酶II为含中性蛋白酶0.2mg/mL、II型胶原酶1~3mg/mL、IV型胶原酶1~3mg/mL、DNaseI0.1mg/mL和CaCl<base:Sub>2</base:Sub>0.04~0.06mg/L的HBSS培养基。本发明优点包括:操作简便,无需特殊仪器设备即可实现,可于短时间内获得高活性的肾脏
一种从猪皮肤组织中分离制备单细胞悬液的方法.pdf
本发明涉及从组织中分离单细胞的研究技术领域,具体涉及猪的皮肤组织的解离及单细胞悬液制备的方法。所述方法包括:通过多种类型消化酶按一定比例混合配制的皮肤组织复合消化酶液,解离皮肤组织,释放出组织中的细胞,再通过过滤、裂解红细胞、去细胞结团等步骤,制备高质量的符合单细胞测序上机要求的皮肤组织单细胞悬液。本发明能够将猪皮肤中的胶原纤维、弹性蛋白等具有高“粘性”且高密度的组织结构与细胞有效分离,得到数量多、活率高的单细胞悬液,并成功在单细胞测序技术中应用,攻克了现有皮肤组织单细胞得率及细胞活率较低的难题。
一种肾脏移植用离体肾脏灌注器.pdf
本发明提供一种肾脏移植用离体肾脏灌注器,涉及离体器官灌注领域,以解决,现有的离体肾脏灌注器需要调节离体肾脏的高度,灌注时溢出的液体容易存留对离体肾脏进行浸泡导致肾脏出现损伤的问题,包括支撑机构,所述支撑机构的上方安装有接触机构;所述支撑机构的前端安装有固定机构;所述接触机构的上方安装有安装机构;所述安装机构的后端安装有连接机构;所述固定机构的前端安装有循环机构和收集机构。第一循环件通过输液泵将储液件内部的灌注液输入到肾脏内部,第二循环件的吸液泵,辅助第二循环件吸出肾脏内部的灌注液,灌注液进入到第二循环件的
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本发明公开了一种人体血管周围脂肪组织单细胞悬液制备方法,包括:脂肪组织预处理:将采集的脂肪组织清洗至无血液残留,再将脂肪组织切成1‑5mm的脂肪微粒;预消化:脂肪微粒中滴加胶原酶至覆盖住脂肪组织,再剪碎脂肪组织,直至变为酱状;消化:将预消化后的脂肪组织再加入胶原酶,37℃水浴消化20分钟,期间反复改变摇动方向,离心摇动;过滤:将上步获得的消化液过40μm孔径的细胞滤筛,加入相同体积的DPBS后置于冰上;取筛网上未通过的组织块,重复消化和过滤步骤;将最终获取的消化液离心,离心后分层,吸取上清,将底部细胞重悬
一种人胎膜组织单细胞快速解离试剂盒、解离方法及应用.pdf
本发明涉及一种人胎膜组织单细胞快速解离试剂盒、解离方法及应用。所述人胎膜组织单细胞快速解离试剂盒包括如下组分:酶I、酶II、组合酶、稀释缓冲液、中和缓冲液、洗涤缓冲液和3×红细胞裂解缓冲液。本发明所述解离方法先将胎膜组织通过解剖分离为羊膜和绒毛?膜蜕膜两部分,再采用单一酶和组合酶相结合的方式进行同步且独立的酶解,相比其他酶解方式(对比例1~5)不仅显著提升了效率,将解离时间由6h缩短至70min,还在细胞活率、活细胞浓度和结团率上明显占优。即大大降低实验成本的同时还提高了实验的准确性和效率。