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生物：2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》课件细菌能分解尿素的原因：本课题目的你会去哪里寻找这种细菌？启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。大家有疑问的，可以询问和交流要分离一种微生物，必须根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等；方法：⑴抑制大多数微生物不能生长⑵造成有利于该菌生长的环境15.0g在微生物学上，我们把允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。1、显微镜直接计数：2.间接计数法（活菌计数法）⑴原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。⑵常用方法：稀释涂布平板法。实验经过多次重复的数据才能更准确（平行重复原则）注意事项①为了保证结果准确，一般选择菌落数在30——300的平板上进行计数。②为使结果接近真实值可将同一稀释度加到三个或三个以上的平皿中，经涂布，培养计算出菌落平均数。③统计的菌落往往比活菌的实际数目低。④涂布平板法所选择的稀释度很重要，一般以三个稀释度中的第二个稀释度所出现的平均菌落数在50个左右为最好。（三）设置对照组更具说服力小结：通过这个事例可以看出，实验结果要有说服力，对照的设置是必不可少的。设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。二、制定计划三.实验的具体操作㈠.土壤取样从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的信封中。◆取土样用的小铁铲和盛土样的的信封在使用前都要灭菌。㈡.制备培养基：制备以尿素为唯一氮源的选择培养基。◆应在火焰旁称取土壤10g。◆在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁进行为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？㈣.取样涂布㈤.微生物的培养与观察微生物的培养与观察三.结果分析与评价1.通过对照实验，若培养物有杂菌污染，菌落数偏高；若培养物混入其他氮源，则菌落形态多样，菌落数偏高，难以选择出分解尿素的微生物。2.提示：选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释倍计算每克样品的菌数最合适。同一稀释倍数的三个重复的菌落数不能相差悬殊，如相差较大，表示实验不精确。五.课外延伸在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。大肠杆菌呈黑色中心,有或无金属光泽生物兴趣小组试图探究牛和山羊的瘤胃中的微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能降解尿素的细菌（目的菌）．培养基成分如左表所示，实验步骤如右图所示．请分析回答问题：（1）培养基中加入尿素的目的是___________，原理是_______________________________________________．从同化作用类型来看的，该菌属于____________．（2）实验需要振荡培养，原因是__________________．转为固体培养时，常采用_______________的方法接种，获得单菌落后继续筛选．（3）在实验过程中：①培养基、培养皿；②玻棒、试管、锥形瓶、吸管；③瘤胃中液体．其中需要灭菌是______________（填序号）．（4）分离分解尿素的细菌实验时，甲同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落．甲同学实验结果差异的原因可能有_______（填序号）①取样不同②培养基污染③操作失误④没有设置对照