桑黄提取精制工艺的研究.docx

桑黄提取精制工艺的研究【摘要】目的优选桑黄多糖的提取、精制工艺。方法采用正交实验设计优选桑黄多糖提取工艺。通过吸附法与醇沉法的比较，选出最佳精制工艺。结果桑黄多糖最佳提取工艺为：粉碎粒度60目，浸泡12h，用14倍的水，提取3h，用壳聚糖吸附法精制多糖。结论浸泡时间对实验影响较大，采用壳聚糖吸附法精制，多糖损失少，此提取精制工艺方法可行。【关键词】桑黄；多糖；正交设计；提取；精制Abstract：ObjectiveTooptimizetheextractionandpurificationmethodofthepolysaccharideofPhellinusbsetextractmethodofthepolysaccharidewasdeterminedbyorthogonaldesign.Throughthecomparisonoftheethanolextractionandadsorbingpurification,thebestpurificationmethodwaschosen.ResultsThebestextractionmethodofthepolysaccharideinthePhellinusigniariuswas:thePhellinusigniariusgranularitywasabout60screenmesh,theimmersiontimewas12h,thesolventiswaterandthematerial14:1,andextracted3times.ChitosanabsorbingpurificationwasusedtoextractthePhellinusimmersiontimegreatlyinfluencedtheextractionofPhellinusigniarius.ChitosanabsorbingpurificationwasusedtoextractthePhellinusigniariusandthepolysaccharidelosseslittle.TheextractionandpurificationtechnologyofPhellinusigniariusisfeasible.Keywords：Phellinusigniarius;Polysaccharide;Orthogonaldesign;Extraction;Purification桑黄［1］是寄生于桑树的一种药用真菌。拉丁名为Phellinusigniarius，是担子菌亚门，层菌纲，多孔菌目，多孔菌科，针层孔菌属类真菌。国内外研究表明桑黄具有抗肿瘤作用［2］，有关文献［3］报道灵芝、桑黄及阿加里斯茸等真菌类植物具有一定的抗癌作用，实验表明桑黄的抗癌效果最佳，其主要有效成分为桑黄多糖。桑黄的多糖类物质是影响生物机体内免疫机构的淋巴球增殖及其活性物质的重要物质，依靠免疫活性的媒介作用，使之增加对外部因子的免疫性，造成癌细胞的破坏，具有在生物内副作用少的优点，因此对桑黄多糖的提取工艺研究具有重要的意义。本研究采用正交实验设计优选出最佳方案，采用吸附法，多糖损失少，为多糖的提取精制提供了有效途径。1仪器与试剂1仪器UV-7504紫外可见分光光度计；SC202-0型电热恒温干燥箱；BUCHIRotavaporR-200﹠BUCHIHeatingBathB-490减压蒸馏仪；HH-S数显恒温水浴锅；80-2离心沉淀机；SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵；电动搅拌器电机。2药材试剂桑黄；壳聚糖；葡萄糖［AR，中国医药上海化学试剂公司］；其它试剂均为分析纯。2方法与结果含量测定［4］标准曲线的绘制葡萄糖标准溶液的配制：精确称取干燥恒重(105℃)的葡萄糖25.1mg，置250ml容量瓶中，加水至刻度，摇匀，配成浓度为100.4μg/ml标准葡萄糖溶液备用。5%苯酚试剂的配制：称取蒸馏后苯酚7.5g，加水150ml溶解，置棕色瓶内放冰箱备用。标准曲线的绘制：精确量取葡萄糖标准溶液,,,,,ml置干燥试管中分别再加水使其成ml，再分别加入5%苯酚溶液ml，摇匀。然后加浓ml，充分摇匀，室温放置25min，在490nm处测定其最大吸光度，同时做一空白。以吸光度对葡萄糖浓度线性回归，得回归方程为Y＝4X+4(r＝2，n＝6)。实验表明，葡萄糖在～μg/ml范围内呈现良好的线性关系。见图1。图1标准曲线样品测定样品经处理后(供试品溶液的制备)，移至250ml容量瓶中，定容，摇匀，精确吸取2ml到25ml容量瓶，定容，摇匀成为样品液。测定时，精确吸取样品液1ml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值，按下式计算多糖含量：多糖含量=CD/W×100%式中：C为样品溶液中葡萄糖的浓度(μg/ml)；D为样品溶液的稀