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中药多糖研究进展【关键词】中药多糖；抗癌免疫；化学研究［摘要］目的：对中药糖的研究进展作一个综述。方法：从中药多糖的提取分离和纯化及其化学结构与功效关系两方面进行综述。结果：中药多糖可用水提醇沉法提取。用色谱法分离纯化，多数中药多糖具有增强机体免疫功能及抗肿瘤等药理作用。结论：可为中药多糖的进一步开发研究提供科学依据。［关键词］中药多糖；抗癌免疫；化学研究多糖是由单糖连接而成的多聚物，人们对多糖的初始研究可追溯到1936年Shear对多糖抗肿瘤活性的发现，至20世纪50年代，陆续发现一些真菌多糖和高等植物多糖具有明显的抑瘤活性。70年代以来，科学家们发现多糖及糖复合物在生物体内不仅是作为能量资源和构成材料，更重要的是它存在于一切细胞膜结构中，参与生命现象中细胞的各种活动。中药多糖因具有增强机体免疫功能及抗肿瘤等药理作用，而且几乎没有毒性，愈来愈引起国内外药理学家、生物学家和化学家们的兴趣，成为当前的研究热点。1中药多糖的提取、分离和纯化提取多糖是极性大分子化合物，易溶于水，不溶于乙醇。常用水做提取溶剂，其他有用稀碱水溶液提取［1］、氯化钠水溶液梯度洗脱［2］，应特别注意的是，多糖在碱性较强时也会水解［3］。也有用超声处理以加速多糖释放的提取方法。多糖水溶液浓缩后，加入95%乙醇醇沉，醇沉的醇浓度根据多糖的结构和性质而不同，一般在70%~85%的范围。静置24h后，分取沉淀。然后进行去小分子杂质，去蛋白质，去色素等处理，水层再进行醇沉，沉淀分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤，60℃减压干燥。分离和纯化多糖的分离纯化常需要使用多种方法，小分子杂质可选用不同孔径的透析膜，用透析法去除。多糖中的游离蛋白质的去除方法［4］有Sevag法，三氟三氯乙烷法和三氯醋酸法。前两种方法常用于微生物多糖的分离，后者多用于植物多糖。而上述三法皆不适用于由糖和肽共价结合而成的糖肽类。因为糖肽在处理中也被沉淀出来，因此结合蛋白质的去除常先用蛋白酶破坏蛋白质与糖的结合再去除蛋白。多糖的分离纯化方法除经典的分离沉淀外，还有季胺盐沉淀法，金属络合法，盐析法和制备性区域电泳法等，目前，中药多糖的分离纯化在细分阶段一般常用凝胶色谱法和离子交换色谱法［5］。色谱分离纯化多糖主要依据被分离多糖组分间的理化性质差异及其在固相载体和流动相之间分布和流动速度的差异而达分离。2中药多糖化学结构与功能关系多糖的化学结构十分复杂,其结构与功能的关系尚不十分清楚。友田正司［6］指出多糖复合物有多种多样的生物活性，多糖结构不同，生物活性必有差异。研究发现，多糖的糖链在分子生物学中具有决定性的作用，它能控制细胞分裂和分化、调节细胞的生长和衰老［7］。如抗肿瘤香菇多糖及裂褶菌多糖都是基本上具有类似构造的β1，6结合分支的β1，3葡聚糖，除经口给药外，经皮下、肌肉、静脉、腹腔等各种给药途径均有效。Hirano等［8］对多糖活性决定族研究中认为分支区与抗补体作用、促进有丝分裂和调节巨噬细胞FC受体兴奋性的活性有关。枸杞子多糖中具有1，4连接的多聚半乳糖醛酸主链结构的多糖免疫活性较强。硫酸化均多糖比硫酸化杂多糖有更强的活性。另外，多糖的活性与溶解度有着重要关系［9］。3中药多糖研究现状中药多糖能提高机体免疫监视系统，包括天然杀伤细胞(NK)、巨噬细胞(MΦ)、杀伤性T细胞(CTL)、T细胞、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、白介素(IL)和其他细胞因子的活性来达到杀伤肿瘤细胞的目的。猪苓多糖、茯苓多糖、中华猕猴多糖及黄芪多糖均能刺激NK细胞增殖，提高其活性。小鼠腹腔注射枸杞多糖5g/L(7d)可以显着增强NK细胞的杀伤功能，并能部分对抗环磷酰胺对小鼠NK细胞的抑制作用［10］。关于多糖激活巨噬细胞的机制，目前尚未完全清楚。已证明香菇多糖能激活巨噬细胞，能选择性提高小鼠腹腔巨噬细胞的活性，并增加其绝对数量［10］；黄芪多糖不仅可以增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和数量，而且可完全对抗泼尼松龙(25mg/kg)对吞噬功能的抑制作用；当归多糖可显着增强巨噬细胞的吞噬功能，同时可拮抗环磷酰胺对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的抑制作用；淫羊藿多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能及巨噬细胞活性有明显增强效用，这种效用随剂量的降低而降低。李明春等［11～14］就灵芝多糖(GLB7)对小鼠腹腔巨噬细胞信号转录过程的影响进行了深入研究，证实灵芝多糖能增强小鼠巨噬细胞的吞噬功能，引起小鼠巨噬细胞Ca2+和pH值升高，增加巨噬细胞内三磷酸肌醇(IP3)和二酰基甘油(DAG)以及cAMP和cGMP的生成，在转录水平促进小鼠巨噬细胞分泌细胞因子并影响其蛋白激酶活性。此外，从人参、柴胡、黄芪、银耳等植物中分离提取的多糖能显着增强腹腔巨噬细胞的吞噬能力，从麦冬、板蓝根、毛木耳、淫羊藿等植物中得到的多糖能提高