灵芝孢子多糖胶囊增强免疫力的研究(二).docx

灵芝孢子多糖胶囊增强免疫力的研究（二）【摘要】目的观察中科特泰胶囊对小鼠免疫力的影响。方法将120只健康雌性小鼠分为3个实验组，每组分高、中、低和对照4个剂量组，连续灌胃给药30d后，分别进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴细胞转化、NK细胞活性试验以及小鼠抗体生成实验，测定相关的免疫学指标。结果高、中剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬能力、淋巴细胞转化、NK细胞活性以及抗体生产均有明显的提高，与对照组比较有显着性差异。结论中科特泰胶囊对小鼠的免疫力具有一定的增强作用。【关键词】特泰胶囊淋巴细胞转化NK细胞抗体生成Abstract:ObjectiveToobservetheimmunemodulationeffectofZhongkeTetaiCapsuleonSDratsweredividedinto3groups,eachgroupwasadministeredwithhigh,medium,lowandcontroldoserespectively.Aftergastricinjectionfor30days,testofratsceliacmacrophagephagocytosingchickenredbloodcell，lymphocytetransformationtest,NKcellactivitytest,ratsantibodyformingtestwerecarriedtotesttherelativeimmune,mediumgroupenhancedratsphagocytingability,lymphocytetransformationability,NKcellactivityandantibodyformingabilitywhichshowedobviousdifferencefrommodelgroup.ConclusionZhongkeTetaicapsulecanimproveratsimmunity.Keywords:TetaiCapsule；Lymphocytetransformation；NKcell；Antibodyforming自20世纪70年代日本学者率先报道了灵芝具有抗肿瘤作用后，国内学者在研究灵芝“扶正固本”的中医药理过程中，发现灵芝多糖具有多种免疫增强作用，并提出灵芝多糖的抗肿瘤作用也是通过提高动物的免疫功能介导的。中科特泰胶囊主要成分为灵芝多糖和多肽，在前期免疫学实验中，其对小鼠炭粒廓清能力，血红素生成能力等方面都有一定的提高，提示对小鼠免疫力有一定的改善作用。本实验拟考察特泰胶囊对淋巴细胞转化、NK细胞活性以及小鼠抗体生成方面的影响。1材料与方法1材料样品中科牌特泰胶囊由南京中科药业有限公司提供，为瓶装胶囊，内容物为褐色粉末，人体推荐量为内容物净重每人800mg/d。置于密闭、阴凉干燥处保存，供试验用。试剂SRBC，RPMI1640，ConA，MTT，异丙醇，SA缓冲液，YAC-1细胞，LDH基质液。2动物选用上海西普尔-必凯实验动物有限公司繁殖的～gF1健康雌性小鼠120只，合格证号：SCXK2003-0002，随机分为3个实验组，分别进行小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、淋巴细胞转化、NK细胞活性试验以及小鼠抗体生成实验。3剂量每个实验组分别分为67mg/kg、133mg/kg、400mg/kg和空白对照组。经口每日一次给于小鼠相应剂量的受试物，空白组给于等剂量的生理盐水。连续给药30d后测量各项增强免疫力功能指标。4仪器T1000型电子动物称、722型分光光度计、超净工作台、酶标仪、二氧化碳培养箱。5方法小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验各剂量组连续灌胃30d，制备20%的鸡红细胞悬液，每只鼠腹腔注射1ml，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，正中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1min，然后吸出腹腔洗液1ml，平均滴到2片载玻片上，移置37℃温箱孵育30min，然后于生理盐水中漂洗，晾干，以1∶1丙酮甲醛溶液固定，4%Giemsa-磷酸缓冲液染色3min，再用蒸馏水漂洗晾干，光镜下观察。ConA诱导小鼠淋巴细胞转化实验［1］各剂量组连续灌胃30d，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾，研磨制成单个细胞悬液，调整细胞浓度为3×106个/ml悬浮于1640培养液中，种植于24孔培养板，加75μlConA液作为诱导组，不加为对照组。5%CO237℃孵箱培养72h后，MTT法测定淋巴细胞。NK细胞活性测定实验［2］各剂量组连续灌胃30d，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取脾，研磨制成单个细胞悬液，离心，弃上清，将细胞加入ml灭菌水20s，裂解红细胞后加入ml的2倍Hank‘s液及8mlHank‘s液，离心后悬浮于1640培养液中，1%冰醋酸稀释后计数，调整细胞浓度2×10