多重耐药鲍曼不动杆菌β.docx

多重耐药鲍曼不动杆菌β【关键词】,多重耐药鲍曼不动杆菌［摘要］目的：了解我院临床分离的多重耐药鲍曼不动杆菌β内酰胺酶基因分布情况。方法：用三维试验检测15株多重耐药鲍曼不动杆菌ESBLs、AmpC、MBL产酶情况；用PCR方法检测各种β内酰胺酶基因。结果：三维试验检出2株菌产ESBLs；9株菌产AmpC；3株菌合产ESBLs和AmpC酶；3株菌产MBL。PCR检出15株菌均携带blaTEM基因；2株菌携带blaPER1基因；14株菌携带AmpC基因；未检出产金属β内酰胺酶基因。结论：我院多重耐药的鲍曼不动杆菌多含有blaTEM基因和AmpC基因，也首次发现部分产PER型ESBLs鲍曼不动杆菌。［关键词］多重耐药鲍曼不动杆菌;β内酰胺酶;基因型StudyontheGenotypeofβlactmasesinMultiresistantAcinetobacterBaumanniiStrainAbstract：ObjectiveToinvestigatethedistributionongenotypeofβLactmasesinmultiresistantacinetobacterbaumanniistrainisolatedfromourThreedimemensionalextracttestswereperformedtodetectthestrainsofESBLsproducingandAmpCproducingandMBLproducingin15MultiresistantAcinetobactergenotypeofβLactmasesweredetectedbyPCR2strainsESBLsproducingand9strainsAmpCproducing,3strainsESBLsproducingplusAmpCproducingand3strainsMBLproducingwithAmpCproducinghavebeendetectedbythreedimemensionalextract15strainshaveblaTEMgeneand2strainshaveblaPERgene,14strainshaveAmpCgeneandhaven‘tMBLproducinggenebyPCRThemostmultiresistantacinetobacterbaumanniihaveblaTEMandAmpCgene,alittlestrainshaveESBLsofPERtypeandnoMBLofIMPtype.Keywords：MultiresistantAcinetobacterbaumannii;βLactmases;Genotype鲍曼不动杆菌是院内感染的重要病原体之一，近年来，许多医院鲍曼不动杆菌的分离率在逐年上升，仅次于假单胞菌和大肠埃希菌。同时，多重耐药的鲍曼不动杆菌已成为医院感染的重要病原菌。在其复杂耐药机制中，产β内酰胺酶是其主要耐药机制［1］。鲍曼不动杆菌不仅有产广谱β内酰胺酶，而且近年来还发现有产超广谱β内酰胺酶、AmpC酶和碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌［2］，给临床治疗带来很大困难。为了解我院多重耐药鲍曼不动杆菌的耐药机制，我们对本院分离的15株多重耐药的鲍曼不动杆菌进行了β内酰胺酶基因型研究。1材料与方法菌株来源15株只对亚胺培南敏感的多重耐药鲍曼不动杆菌来自我院2004年7月至2005年1月临床分离的标本，其中痰液12份、创面3份。均经Vitek-32型全自动微生物鉴定仪的VitekGNI鉴定卡统一进行鉴定。标准菌株产ESBLs肺炎克雷伯菌ATCC700603、高产AmpC酶阴沟肠杆菌029M标准株由安徽医科大学第一附属医院惠赠；大肠埃希菌ATCC25922由本实验室保存。耐药性被研究的15株鲍曼不动杆菌除了2株耐受亚胺培南，其他13株对亚胺培南全部敏感；对头孢哌酮/舒巴坦有1株敏感，14株中介；有1株对氧氟沙星和环丙沙星敏感；对氧哌嗪青霉素/他唑巴坦、头孢吡肟、阿米卡星、头孢他啶中介各1株；对其他抗生素均耐受。主要试剂克拉维酸为南京本原制药厂赠送，氯唑西林为上海四药股份有限公司产品，MH琼脂为法国生物梅里埃公司产品，胰蛋白大豆肉汤为英国OXOID公司产品。主要仪器设备微生物鉴定仪为法国生物梅里埃公司生产的Vitek-32型全自动微生物鉴定仪；冰箱为日本三洋MDF-382型超低温冰箱；离心机为德国Hettich公司产品MIKRO22R型低温超速离心机；PCR扩增仪为美国PERKINELMER公司9600型基因扩增仪。酶提取物制备将分离鉴定的细菌挑取数个菌落接种到30ml胰蛋白胨大豆肉汤中，35℃恒温振荡培育10h~14h，4℃4000r/min离心30min弃上清液，收集沉淀物加