止痢宁片中苦参碱的HPLC测定.docx

止痢宁片中苦参碱的HPLC测定【摘要】目的用HPLC法测定止痢宁片中苦参碱的含量。方法HPLC用外标一点法，KromasilNH2柱，乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液为流动相，流速为/min，λ=220nm。结果苦参碱在～/ml范围内呈良好线性，回归方程为Y=+，r=，平均加样回收率%，RSD为%。结论方法简便、准确，专属性强，测定结果重复性好，为止痢宁片中苦参碱的定量分析提供了科学有效的方法。【关键词】止痢宁片；苦参碱；HPLC【Abstract】ObjectiveToestablishthemethodfordeteminingthecontentofMatrineinZhiliningpianbyUsingKromasilNH2Column,Acetonitrile-Ethanolabsolute-3%Phosphoricacidglacialasthemobilephase,detectionwavelengthas220nmandflowratewas/Thecalibrationcurvewaslinearatarangeof/ml～/mlfortheMatrineandlinearequationwasY=r=Theaveragerecoverywas%andtherelatedstandarddeviationwas%.ConclusionThismethodwassimpleandaccurateandproper,whichcanbeprovideforscientificquantitativeanalysismethodofMatrineinZhiliningPianandthereduplicationoftheresultwasgood.【Keywords】ZhiliningPian；matrine；HPLC止痢宁片收载于部颁药品标准中药成方制剂第四册中，功能主治：清热祛湿，行气止痛。用于肠炎、痢疾，表现为腹痛泻泄，下痢脓血，肛门灼热，里急后重者［1］。处方由穿心莲、苦参、木香组成，原标准中只有检查项，没有含量控制项。为了更好地控制止痢宁片的质量，提高止痢宁片的质量标准，笔者对止痢宁片处方进行了分析，经过预试验及参考相关资料，进行本品中苦参碱含量测定，并进行了方法学研究，控制药品质量。采用高效液相色谱法测定苦参碱含量，方法简便快速，稳定可靠，专属性强。1仪器与试药仪器高效液相谱仪：SPD-10A日本岛津；紫外分光仪：上海康化生化仪器制造厂；超声波清洗器：SK3200H上海科导超声仪器有限公司。试药苦参碱对照品由中国生物制品检定所提供；止痢宁片由河南百年康鑫药业有限公司提供；止痢宁片对照药品由江西某药业有限公司生产；其他试剂均为分析纯。2方法与结果色谱条件［2］以氨基键合硅胶为填充剂；以乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液为流动相；检测波长为220nm；流速为1ml/min；柱温为室温。理论板数按苦参碱峰计算应不低于2000。溶液的制备对照品溶液的制备取苦参碱对照品适量，精密称定，加乙腈-无水乙醇溶液，制成每毫升含苦参碱的溶液，即得。色谱图见图1。图1苦参碱对照品色谱图供试品溶液的制备取本品20片，研细，取，精密称定，精密加入/L盐酸溶液50ml振摇使溶解，滤过，精密量取续滤液25ml，置分液漏斗中，用三氯甲烷15ml振摇提取1次，弃去三氯甲烷提取液，水层用氨试液调至强碱性，用三氯甲烷提取4次，合并三氯甲烷液，置水浴上蒸干，残渣用乙醇适量转移至10ml量瓶中，加乙醇至刻度，摇匀，用微孔滤膜滤过，即得。色谱图见图2。图2止痢宁片色谱图阴性样品的测试取缺苦参的样品，按供试品制备法制备阴性样品后测定，在苦参碱相应位置无峰出现，说明阴性样品的其他成分无干扰。色谱图见图3。图3阴性样品色谱图线性关系的考察精密称苦参碱对照品适量，用乙腈-无水乙醇溶液稀释制成不同浓度的对照品溶液，分别为、、、、、/ml，各进样10μl，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，苦参碱的浓度为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程Y=+，r=,表明苦参碱在～/ml之间呈良好的线性关系。精密度试验取浓度为/ml的苦参碱对照品溶液，精密吸取10μl，连续进样6次，测定峰面积，测定结果RSD为%，表明精密度良好。重现性试验取本品20片，称取总重后研细，分别称取6份，每份，精密称定，然后按供试品溶液制备方法制备供试品溶