毛细管电泳法快速测定齐墩果酸片的含量.docx

毛细管电泳法快速测定齐墩果酸片的含量【摘要】目的建立快速测定齐墩果酸片含量的方法。方法采用毛细管电泳法，未涂层弹性石英毛细管；压力进样，压力：kPa；进样时间：5s；分离电压：25kV；柱温：25℃；检测波长：200nm；运行缓冲液：含5％甲醇的20mmol·L-1硼砂溶液(pH)；运行时间：10min。结果齐墩果酸的线性范围为～660μg·mL-1，平均回收率为%，RSD为%(n=6)。结论方法准确、快速、简便，适于齐墩果酸片的含量测定。【关键词】齐墩果酸片毛细管电泳含量测定Abstract:ObjectiveToestablishanHPCEmethodforrapidmonitoringthecontentofoleanolicacidinoleanolicacidtablets.MethodsSampleswereanalyzedonafusedanduncoatedsiliccapillaryof75μm×50cm(40cmofeffectivelength).20mmol·L-1ofboraxcontaining5%methanolwasusedasrunningbuffer.Sampleswereinjectedhydrodynamically(5s,kPa)intothecapillary.Theappliedvoltagewas25kVandthedetectionwavelengthwassetat200nm.Thetemperaturewaskeptat25℃.Therunningtimewas10min.ResultsThecalibrationcurvewaslinearintherangeofμg·mL-1(r=)foroleanolicacid.Theaveragerecovery(n=6)was%withRSD%.ConclusionThismethodisaccurate,rapid,andsimpleforthecontentdeterminationofoleanolicacid.Keywords:oleanolicacidtablet;HPCE;contentdetermination齐墩果酸片具有护肝降酶、抗炎、强心利尿、抗肿瘤等作用，上除广泛于急、慢性肝炎的辅助治疗外，也用于配合肿瘤病人的手术、放疗、化疗，促进免疫功能恢复以及再生障碍性贫血、红斑狼疮等免疫缺陷性疾病。目前国内有许多厂家生产齐墩果酸片，生产上采用酸碱非水滴定法［1］测定其含量，但该方法终点不易掌握，专属性差，误差较大。也有采用比色法［2］、薄层扫描法［3］、HPLC法［4］等测定齐墩果酸片的含量，但以上方法均存在费时长、样品用量多、操作繁琐等问题。而毛细管电泳法具有高效、快速、准确、操作简便、样品用量少等优点，适合快速分析样品［5］。笔者采用毛细管电泳测定齐墩果酸片中有效成分的含量，结果方法快速、灵敏、简便、结果准确。1仪器与试药俄罗斯LumexCAPEL105型毛细管电泳仪，紫外检测器，弹性石英毛细管。齐墩果酸对照品由中国药品生物制品检定所提供；齐墩果酸片；硼砂、硼酸、乙醇、甲醇、乙腈均为分析纯，实验用水为重蒸水。2方法与结果分离条件进样方式，压力进样，压力kPa，进样5s；分离电压为25kV；柱温25℃；紫外检测波长200nm；以含5％甲醇的20mmol·L-1硼砂溶液(pH)为运行缓冲液。实验前，毛细管依次用mol·L-1盐酸、重蒸水、mol·L-1NaOH溶液、重蒸水各冲洗5min，然后用运行缓冲液冲洗3min。在每2次运行之间，毛细管用mol·L-1NaOH溶液冲洗2min，重蒸水和运行缓冲液各冲洗3min。试验前运行缓冲液用μm滤膜过滤和超声波脱气。齐墩果酸对照品和齐墩果酸片样品的色谱见图1。A.齐墩果酸对照品;B.齐墩果酸片样品;C.阴性样品;1.齐墩果酸图1毛细管电泳图Figure1CEchromatograms溶液制备对照品储备液的制备精密称取齐墩果酸对照品mg于10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，以μm滤膜过滤，即得。供试品溶液的制备取供试品20片精密称定，研细，精密称取细粉适量(约相当于齐墩果酸20mg