舒肝保健茶齐墩果酸含量测定.docx

舒肝保健茶齐墩果酸含量测定【摘要】目的建立舒肝保健茶中齐墩果酸的含量测定方法。方法采用RPHPLC法以WaterssymmetryshieldC18柱（3.9mm×150mm5μm）为色谱柱乙腈水（体积比71∶29）为流动相流速为1.0mL/min检测波长为220nm柱温25℃。结果在0.0790～1.264μg范围内齐墩果酸的进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系r=0.9999平均回收率为96.5%RSD为1.0%（n=6）。结论本法灵敏、简便、重现性好结果准确、可靠可用于舒肝保健茶的质量控制。【关键词】反相高效液相色谱法；舒肝保健茶；齐墩果酸舒肝保健茶是由天津中医药大学中医药研究院制剂中心新研发的一种复方保健品主要由藏茵陈、栀子、淡竹叶、甘草等成分组成具有清热解毒、舒肝利胆的作用可用于预防肝炎主要用于病毒性肝炎、脂肪肝、消化不良的防御和治疗。藏茵陈是此方中的君药其主要有效成分是齐墩果酸。文献报道齐墩果酸已成为有效的抗肝炎的单体成分具有保肝、解肝毒的作用［1］。本文建立了舒肝保健茶中主要药效活性成分齐墩果酸的HPLC含量测定方法结果令人满意。1仪器与试药Waters2695液相色谱系统：四单元数码梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器、柱温箱、Waters2487DAD检测器、Empower工作站；METTLERTOLEDOAX205（瑞士）十万分之一天平；BP121S万分之一天平（瑞士沙脱利斯公司）。舒肝保健茶（批号：061211061212061213）由天津中医药大学中医药研究院制剂中心提供；齐墩果酸对照品（批号：110709-200304）购于中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯水为高纯水。其它试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶采用WaterssymmetryshieldC18柱（3.9mm×150mm5μm）流动相为乙腈水（体积比71∶29）检测波长为220nm流速为1.0mL/min采用25℃柱温。理论塔板数按齐墩果酸色谱峰计算不低于4000。2.2对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品适量加80%（质量分数）乙腈制成0.1mg/mL的溶液即得。2.3供试品溶液的制备取舒肝保健茶研细取约2g精密称定加入水20mL溶解再用乙醚萃取3次每次20mL分取乙醚层合并蒸干用80%（质量分数）乙腈溶解转移至5mL容量瓶中定容至刻度滤过作为供试液。2.4阴性对照溶液的制备取处方量以相同工艺制备缺藏茵陈阴性制剂依“2.3”项下方法操作即得。2.5专属性试验分别取对照品溶液、供试品溶液和阴性对照溶液各10μL注入液相色谱仪记录色谱图。结果为：齐墩果酸对照品和供试品色谱图中齐墩果酸峰与其它组分峰基线分离分离度大于1.5保留时间为17.490min；阴性对照色谱图中与齐墩果酸对照品以及供试品色谱图中相对应的保留时间处无色谱峰出现表明其它组分对齐墩果酸的测定无干扰见图1。2.6线性关系考察精密称取50℃减压干燥至恒重的齐墩果酸对照品6.32mg置50mL容量瓶中加80%（质量分数）乙腈溶解并定容至刻度摇匀（质量浓度为126.4μg/mL）分别用80%（质量分数）乙腈配成浓度为126.4、63.2、31.6、15.8、7.90μg/mL的对照品溶液各取10μL进样按“2.1”项下色谱条件测定以峰面积（A）为纵坐标对照品浓度（ρ）为横坐标绘制标准曲线得回归方程为：A=1754.3(ρ)+1355；r=0.9999齐墩果酸在0.0790～1.264μg/mL范围内呈良好的线性关系。2.7精密度试验精密吸取同一份供试品溶液连续进样6次测定齐墩果酸峰面积值RSD为1.7%（n=6）表明精密度良好。图1HPLC色谱图（略）A.对照品;B.样品;C.阴性对照（缺藏茵陈）Fig.1HPLCChromatograms（Acontrolstandard;BSample;CNegativesample）2.8稳定性试验按“2.3”项下操作制备一份供试品溶液分别于0、2、4、6、8、10、12h测定齐墩果酸峰面积RSD为0.35%结果显示供试品溶液在12h内稳定。2.9重复性试验取同一批号供试品（批号：061211）6份各约2g精密称定分别按“2.3”项下操作制备供试品溶液测定得平均质量分数为147.9μg/gRSD为1.4%（n=6）表明该方法的重复性较好。2.10加样回收率试验取本品（批号：0612