海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制的研究.doc

海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制的研究目的探讨海藻酸钙敷料的体外止血效果及止血机制。方法抽取健康志愿者肘静脉血,与38g/L的枸橼酸钠按1：9比例混匀。通过动态凝血实验评价海藻酸钙敷料的体外止血效果,设纳吸棉组、医用棉纱布组和空白组作为对照；将lml枸橼酸钠抗凝血滴加至5mg海藻酸钙敷料上,室温静置2min,经漂洗、固定后,扫描电镜下观察材料与血液的相互作用,设纳吸棉组和医用棉纱布组作为对照；分离红细胞并制成40%的红细胞悬液,取lml红细胞悬液滴加至5mg海藻酸钙敷料上,静置15s,用生理盐水洗掉未黏附的红细胞,加入lml生理盐水,室温下孵育1小时,扫描电镜下观察红细胞形态,设纳吸棉组与医用棉纱布组作为对照；分离红细胞,取沉淀红细胞lml于刻度试管中,分别用4m1不同浓度的(10g/L,5g/L,2.5g/L)海藻酸钙敷料浸提液悬浮红细胞,观察30min,60min,120min后红细胞沉降情况,然后分别混匀、涂片,显微镜下观察红细胞聚集程度,设生理盐水组作为空白对照；分离富血小板血浆(PRP),PRP分别与不同浓度的(10g/L,5g/L,2.5g/L)海藻酸钙敷料浸提液于37℃共孵育,用流式细胞仪检测CD62P阳性血小板百分率,设生理盐水组作为空白对照；用Fluo-3,AM负载PRP,洗涤后加入不同浓度的(10g/L、5g/L、2.5g/L)海藻酸钙敷料浸提液,37℃避光孵育,激光共聚焦显微镜下观察血小板内钙离子荧光。结果动态凝血实验表明,海藻酸钙敷料能明显加速内源性凝血进程,止血效果优于纳吸棉和医用棉纱布；海藻酸钙敷料与抗凝血接触后,扫描电镜下可见致密的纤维蛋白网形成,其中网罗大量血细胞,纳吸棉组与医用棉纱布组仅见少量红细胞及血小板黏附,未见纤维蛋白网形成；扫描电镜下可见,红细胞与海藻酸钙敷料相互作用后,细胞膜有伪足样改变,纳吸棉组与医用棉纱布组红细胞形态无明显变化；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量与时问依赖性促进红细胞沉降,组问两两比较差异有显著性意义(P<0.01)；显微镜下可见海藻酸钙敷料浸提液能促进红细胞叠连；海藻酸钙敷料浸提液呈剂量依赖性提高CD62P阳性血小板百分率,组问两两比较差异有显著性意义(P<0.01)；随着藻酸钙敷料浸提液浓度的增加,血小板内钙离子荧光强度增加。结论海藻酸钙敷料止血效果良好,可通过释放钙离子、引起红细胞聚集、活化红细胞和血小板等多个环节促进血液凝固,说明该敷料在止血领域有极高的临床使用价值。