应用影像技术观察骨髓间充质干细胞治疗染矽尘大鼠的研究.doc

应用影像技术观察骨髓间充质干细胞治疗染矽尘大鼠的研究目的:探讨小动物PET-CT和CT动态观察活体大鼠矽肺模型的可行性及骨髓间充质干细胞（BMMSCs）对染矽尘大鼠肺纤维化的作用。方法:1、无特定病原体级健康SD大鼠分为模型组和对照组,模型组一次性气管内注入质量浓度为30g/L的矽尘混悬液建立大鼠矽肺模型,对照组与等体积的0.9%氯化钠溶液。2组大鼠均于于造模后第1、2、3、4、6、8和12周分别随机选取6只,以小动物正电子发射计算机断层显像（PET）/计算机体层扫描（CT）进行肺部CT扫描并检测CT值,同时进行PET-CT扫描并检测¹⁸F-氟代脱氧葡萄糖标准化摄取值（SUV）。扫描后处死大鼠,检测肺脏脏器系数,进行肺脏病理组织学观察,检测血清转化生长因子β1（TGF-β1）、白细胞介素1（IL-1）和肺组织羟脯氨酸（HYP）水平。2、将SPF级SD大鼠随机分为2周组、4周组、模型组、正常组,每组6只,雌雄各半。前三组每只大鼠均通过气管注射0.5ml质量浓度为40mg/ml的无菌二氧化硅（SiO₂）悬液,正常组注射无菌生理氯化钠溶液0.5ml,同时用全骨髓贴壁法分离培养供体大鼠BMMSCs,再分别在染尘第2周和第4周,对2周组和4周组每只大鼠经尾静脉输注0.5ml浓度为5×10⁶/ml的BMMSCs悬液。在第12周对大鼠进行肺部CT扫描,测肺系数,观察大鼠肺部病理切片,检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及血清转化生长因子β1（TGF-β1）浓度,比较不同组大鼠上述检测指标。结果:1、模型组大鼠肺脏病理组织学改变在早期表现为肺组织炎症性渗出,随着时间延长,炎症反应逐渐减轻,而肺间质纤维化逐渐明显;PET-CT和CT影像学表现与病理组织学改变基本一致。模型组大鼠肺部SUV在第1⁴周4个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且呈现随染尘时间的增加而下降（P<0.05）。模型组大鼠肺部CT值在7个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且在第1⁶周呈现随染尘时间的增加而下降（P<0.05）,在第6¹2周呈现随染尘时间的增加而升高（P<0.05）。模型组大鼠肺脏脏器系数在7个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且在第1⁴周呈现随染尘时间的增加而下降（P<0.05）。除第3和4周外,模型组大鼠血清TGF-β1水平在其余5个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且在第1⁴周随染尘时间的增加而下降（P<0.05）,在第4⁸周随染尘时间的增加而升高（P<0.05）。模型组大鼠血清IL-1水平在第1⁴周4个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且随染尘时间的增加而下降（P<0.05）。模型组大鼠肺组织HYP水平在7个时间点均高于同时间点对照组（P<0.05）,且在第6¹2周随染尘时间的增加而升高（P<0.05）。2、肺部CT显示正常组大鼠肺野清透,肺纹理清晰,模型组大鼠肺部见弥漫分布、大小不一的颗粒状高密度影,及条索状或网状纤维影,4周组肺部可见散在的颗粒状高密度影及网状阴影,颗粒大小及分布面积均小于模型组,2周组大鼠肺部可见散在分布的细小颗粒状阴影。模型组、4周组、2周组、正常组肺部平均CT值依次递减,模型组高于正常组,4周组高于2周组[（-177.883±7.610）vs（-210.217±6.406）vs（-259.400±7.599）vs（-367.233±9.887）,P<0.05]。模型组、2周组、正常组肺系数依次递减,模型组高于正常组,4周组高于2周组[（0.544±0.020）vs（0.451±0.022）vs（0.311±0.010）,P<0.05],而4周组和模型组无显著性差异（P>0.05）。肺组织病理切片显示正常对照组大鼠肺泡结构完整,无炎症细胞浸润、渗出及纤维增生;模型组可见大片矽结节融合成片,血管壁增厚,肺泡结构明显减少;4周组矽结节范围较模型组小,肺泡间隔明显增厚;2周组大鼠肺部矽结节又明显少于4周组,部分肺泡间隔增厚。模型组、4周组、2周组、正常组肺组织HYP含量依次递减,模型组高于正常组,4周组高于2周组[（0.923±0.039）vs（1.811±0.115）vs（2.681±0.433）μg/mg肺湿重,P<0.05];血清TGF-β1浓度也按照模型组、4周组、2周组、正常组的顺序依次递减,模型组高于正常组,4周组高于2周组[（41.66