荧光免疫层析技术原理进展宣讲专家讲座.pptx

荧光免疫层析技术基本原理层析法(chromatography)原理是利用混合物中各组分物理性质之差(如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等)而建立来一个分离技术。层析系统是由固定相(stationaryphase)和流动(MobilePhase)相组成。固定相是固体物质或固定于固体物质上成份。流动相是能够流动物质，如水或各种溶剂。层析过程：当待分离混合物随流动相经过固定相时，因为混合物各组分理化性质差异，与固定相相互作用弱组分随流动相移动时受到阻滞作用小，向前移速度快；与固定相相互作用强组分向前移动速度慢。从而实现混合物中各组分分离。免疫层析法免疫层析技术是建立在层析技术和抗原一抗体特异性免疫反应基础上一项新兴免疫检测技术。免疫层析技术以固定有检测线和控制线条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，经过毛细作用使待测物在层析条上移动。待测物在T线处发生特异性免疫反应。游离物在C线处发生免疫反应。荧光（fluorescence）荧光效率荧光淬灭免疫层析技术以固定有检测线和控制线条状纤维层析材料为固定相，测试液为流动相，经过毛细作用使待测物在层析条上移动。待测物在T线处发生特异性免疫反应。游离物在C线处发生免疫反应。荧光免疫层析技术原理进展宣讲专家讲座竞争法竞争法夹心法双抗体夹心法双抗原夹心法利用荧光免疫层析试纸条能够实现对待测物定性或者定量检测.荧光免疫层析技术原理进展宣讲专家讲座金颗粒之间存在静电斥力使其在水中保持相对稳定状态，形成稳定水溶性胶体，即称为胶体金胶体金现有明亮色彩，又有高电子密度，能够吸附生物大分子，且不影响生物分子活性，故可作为生物分子标志物，用于免疫反应中抗原或抗体标识定位，定性甚至定量研究。层析试纸标识用金颗粒直径大多在20～40nm，呈深红色。胶体金作为标志物有以下优势:①几乎可标识全部蛋白分子，过程简单，效率高，用量少，廉价，基本不改变被标识蛋白活性。且稳定，无毒，使用方便，保质期长。②不一样直径纳米金能够用于多重标识。③结果判断只需普通光学仪器或直接肉眼观察。胶体金作为标识物应用试孕纸荧光免疫层析技术原理进展宣讲专家讲座应用（定量）2镧系元素两种不一样镧系元素离子(分别作为光吸收子和发射子)掺杂入亚微米尺寸陶瓷颗粒(作为主基质)中，会组成一类能上转发光产生荧光特殊材料。——UCP(up-convertingphosphor，UCP)颗粒。UCP颗粒主要含有以下三种成份:主基质：氧硫化物（Y2O2S,GdO2S）、氟化物(YF3,GdF3）、硅酸盐(YSi2O5,YSi3O7）...吸收子Yb3+Er3+Sm3+发射子Er3+Ho3+Tm3+UCP独特优势中科院报道了一个用于免疫活性检测UCP试纸条读数计，采取半导体激光器作为光源，CCD作为光电接收器，步进电机带动控制试纸条移动装置军事医学科学院研制出一个UPT十通道免疫层析试纸盘，同时检测各种抗体以确证是否感染鼠疫菌霍乱弧菌—霍乱—烈性肠道传染病甲胎蛋白(AFP）-肝癌特异性指标。3量子点①QDs有可准确调谐发射波长，经过调整粒子尺寸可得到不一样发射光谱，即可使用大小不一样同种QDs颗粒实现不一样颜色标识。②较大Stokes位移和狭窄对称荧光谱峰。使得用同一激发光源可同时激发不一样大小量子点，产生不一样发射光谱，使同时检测多样本成为可能。③QDs荧光性质稳定，可长久保留，经受重复屡次激发。④生物相容性好物理结合化学偶联量子点是一个新荧光标识物，当前在免疫层析中得应用相对UCP，胶体金较少见报道。张国华，赖卫华等，量子点标识免疫层析试纸条快速检测莱克多巴胺研究[J]，，以CdSe为标识物，对莱克多巴胺(一个苯酚胺类β-肾上腺素激动剂)快速定量检测。胡华军，付涛等，CdTe/ZnSe核壳量子点免疫层析试纸条检测克伦特罗研究，,检测克伦特罗(Clenbuterol，CLE)—属于β-兴奋剂类药品,又称“瘦肉精”4有机纳米粒子5纳米磁性颗粒经典是以磁性材料四氧化三铁.表面引入活性基团，经过耦联反应与酶、抗体等生物分子结合形成生物标志物.超顺磁性.6碳纳米管CNTs作为生物分子标志物原理与胶体金类似，其显著黑色在定性或半定量检测中肉眼即可见。当前不论用何种方法制备CNTs，均难以去除其中混杂无定形碳、石墨碳碎片等杂质，这些杂质与CNTs混杂在一起，严重限制了CNTs研究与应用[1].[1]王倩倩，颜红侠，李朋博，等．碳纳米管纯化、性能及应用［J］．化学工业与工程，，27(3):259-265．谢谢！