时间分辨荧光免疫技术专家讲座.pptx

问题时间分辨荧光免疫（TrFIA）（Time-ResoledFluoroimmunoassay）定义发展历程厂家标识物为含有独特荧光特征稀土金属---镧系元素时间分辨经过时间延迟，将特异性荧光与非特异性荧光分辨开来，使本底到达0Stokes位移利用镧系元素光谱特点，将发射荧光与激发荧光分辨开来，零本底又一保障稀土离子激发光、发射光和Stokes位移解离增强技术时间分辨荧光免疫原理时间分辨荧光免疫原理图（Time-resolvedFluorescenceImmunoassay）乙肝“两对半”TRFIA定量检测原理示意图乙肝表面抗原免疫反应图（时间分辨荧光法）乙肝表面抗体免疫反应图（时间分辨荧光法）乙肝ｅ抗原免疫反应图（时间分辨荧光法）乙肝ｅ抗体免疫反应图（时间分辨荧光法）乙肝关键抗体免疫反应图（时间分辨荧光法）时间分辨荧光免疫试剂种类时间分辨荧光免疫分析与其它免疫学方法比较标识免疫学发展历程各种免疫方法学比较放射性免疫分析法（RIA）---标识物：125I酶免疫分析法（ELISA）---标识物：HRP(辣根过氧化物酶）化学发光免疫分析法（CLIA）---标识物：化学发光物质（鲁米诺）电化学发光免疫分析（ECL）---标识物：三联吡啶钌TRFIA在乙肝“两对半”定量检测应用一、提升了检测灵敏度时间分辨荧光法（TRFIA）检测HBsAg灵敏度可到达0.2ng/ml，而酶免法（ELISA）检测HBsAg灵敏度是2ng/ml。缩短了急性乙肝检测“窗口期”（1）定量分析HBsAg和HBsAb浓度改变，能够预见急性乙肝是否处于恢复期如HBsAg浓度降低，HBsAb逐步升高，说明病情正向恢复期发展反之。反之，HBsAg浓度处于高水平或上升，而HBsAb处于低水平，则轻易发展为慢性乙肝或携带者。（3）HBcAb浓度高低能够反应病毒感染状态1、乙肝急性感染常为高滴度HBcAb，恢复期浓度下降，慢性乙肝HBcAb呈连续高浓度。2、低浓度HBcAb普通为恢复期或既往感染。三、乙肝疫苗接种HBsAb是一个真正意义保护性抗体，其定量检测能够对其含有免疫力做出正确评价，对乙肝预防起到监督作用。四、HBV血清学标志物与HBV-DNA关系血清学标志物反应机体对病毒免疫状态，病程，判断病情，不能完全反应病毒在体内复制情况HBV-DNA1、真实反应病毒在体内复制水平，观察药品疗效2、部分“小三阳”及低水平病毒复制时出现阴性3、不能反应机体免疫状态和病情血清HBV-DNA荧光定量PCR测定能够直接反应病毒数量，病毒复制情况，含有很多临床应用价值，但不能完全反应病毒复制静息期肝细胞内HBV病毒状态时间分辨法检测“乙肝两对半”意义NCU/ml单位起源半自动ANYTEST谢谢！