分析化学高效液相色谱.ppt

第三章思考题解答2.液相色谱中影响色谱峰展宽的因素有哪些?与气相色谱相比较,有哪些主要不同之处?3.在液相色谱中,提高柱效的途径有哪些?其中最有效的途径是什么?4.液相色谱有几种类型?它们的保留机理是什么?在这些类型的应用中,最适宜分离的物质是什么?化学键合色谱中由于键合基团不能全部覆盖具有吸附能力的载体,所以同时遵循吸附和分配的机理,最适宜分离的物质为与液-液色谱相同。在离子对色谱色谱中,样品组分进入色谱柱后,组分的离子与对离子相互作用生成中性化合物,从而被固定相分配或吸附进而实现分离的.各种有机酸碱特别是核酸、核苷、生物碱等的分离是离子对色谱的特点。5.在液-液分配色谱中，为什么可分为正相色谱及反相色谱？6.何谓化学键合固定相?它有什么突出的优点?7.何谓化学抑制型离子色谱及非抑制型离子色谱?试述它们的基本原理.但是如果选用低电导的流动相（如１×10-４~5×10-4M的苯甲酸盐或邻苯二甲酸盐），则由于背景电导较低，不干扰样品的检测，这时候不必加抑制柱，只使用分析柱，称为非抑制型离子色谱法．８．何谓梯度洗提？它与气相色谱中的程序升温有何异同之处？９．高效液相色谱进样技术与气相色谱进样技术有和不同之处？10．以液相色谱进行制备有什么优点？11.在毛细管中实现电泳分离有什么优点？12.试述CZE,CGE,MECC的基本原理．毛细管凝胶电泳(CGE)是毛细管内填充凝胶或其他筛分介质，如交联或非交联的聚丙烯酰胺。荷质比相等，但分子的大小不同的分子，在电场力的推动下在凝胶聚合物构成的网状介质中电泳，其运动受到网状结构的阻碍。大小不同的分子经过网状结构时受到的阻力不同，大分子受到的阻力大，在毛细管中迁移的速度慢；小分子受到的阻力小，在毛细管中迁移的速度快，从而使它们得以分离。这就是CGE的分离原理．胶束电动色谱(MECC)是以胶束为假固定相的一种电动色谱，是电泳技术与色谱技术的结合。多数MECC在毛细管中完成，故又称为胶束电动毛细管色谱。MECC是在电泳缓冲液中加入表面活性剂，当溶液中表面活性剂浓度超过临界胶束浓度时，表面活性剂分子之间的疏水基因聚集在一起形成胶束(假固定相)，溶质不仅可以由于淌度差异而分离，同时又可基于在水相和胶束相之间的分配系数不同而得到分离，这样一般毛细管电泳中不能分离的中性化合物．在MECC中可以分离．