血清LDH同工酶测定.ppt

血清LDH同工酶测定及图谱分析关于同工酶同工酶:来源于同一个体或组织，能催化相同的化学反应，但其蛋白质分子结构、理化性质和免疫性能等方面都存在明显差异的一组酶。最典型的同工酶是乳酸脱氢酶（LDH）同工酶。为什么要进行血清LDH同工酶测定？南昌大学医学院文献：鲿科四种鱼LDH同工酶谱的研究【摘要】：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对鲿科四种鱼血清中LDH同工酶进行电泳分析,结果表明:四种鱼血清LDH同工酶图谱的区带分布具有种的特异性;四种鱼血清LDH同工酶A、B亚基比例关系反映的各品种间亲缘的关系与形态学特征分析结果吻合,为鲿科四种鱼分类提供进一步的理论依据.是否人种间在差异呢？这个答案不得而知，但有一点是明确的，那就是LDH同工酶在人体不同器官和组织间是有差异的，从医学角度来讲，利用这种特异性临床上对LDH同工酶的检测可作为某些疾病诊断的依据之一。南昌大学医学院-柱层析法免疫化学法热稳定性和抑制法*电泳法：LDH在电泳中的分离因素以乳酸钠为底物,LDH催化乳酸脱氢生成丙酮酸,同时使氧化型辅酶INAD+还原为NADH,NADH又将氢传递给吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS),PMS再将氢传递给氯化硝基四氮唑蓝(NBT),使其还原为紫蓝色化合物,因此有LDH活性的区带即着紫蓝色且颜色深浅与LDH活性成正比.缓冲液条：内含pH8.4、离子强度0.075的巴比妥缓冲液缓冲琼脂糖凝胶板：内含0.08mol/L，pH8.3巴比妥-盐酸缓冲液EDTA-Na2溶液（10mmol/L），5g/L琼脂糖底物显色液（临用前配制）固定漂洗液打开仪器，选择电泳程序点样、保湿，放电极架、挂缓冲条、放凝胶板放点样梳、电泳，配显色液加显色液吸掉显色液、加固定液吸掉固定液、放厚滤纸烘干胶片扫描4、计算5、注意事项6、图谱分析-16、图谱分析-16、图谱分析-16、图谱分析-26、图谱分析-26、图谱分析-26、图谱分析-26、图谱分析-36、图谱分析-36、图谱分析-36、图谱分析-36、图谱分析-46、图谱分析-46、图谱分析-46、图谱分析-4小结1、LDH是由两种不同的亚基组成的四聚体，形成以下5种结构不同的同工酶A.LD1（H4）/LD2（H3M1）/LD3（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4）B.LD2（H4）/LD1（H3M1）/LD3（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4）C.LD1（H4）/LD2（H3M1）/LD3（H2M2）/LD4（HM3）/LD5（M4）D.LD3（H4）/LD1（H3M1）/LD2（H2M2）/LD5（HM3）/LD4（M4）E.LD5（H4）/LD4（H3M1）/LD3（H2M2）/LD2（HM3）/LD1（M4）2、LDH同工酶在我科使用的检测方法是A.免疫化学法B.琼脂糖凝胶电泳法C.柱层析法D.热稳定性和抑制法3、LDH同工酶琼脂糖凝胶电泳显色是A、酶的催化反应进行显色B、丽春红S染色C、氨基黑10B染色D、与带负电荷染料溴甲酚绿结合显色E、与带负电荷染料溴甲酚紫结合显色4、LDH同工酶电泳参与显色反应易见光分解的是A、吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)B、乳酸钠C、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)D、辅酶INAD+E、巴比妥缓冲液5、下列哪个物质是LDH同工酶琼脂糖电泳酶促反应的底物A、吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)B、氯化硝基四氮唑蓝(NBT)C、辅酶INAD+D、巴比妥缓冲液E、乳酸钠6、LDH同功酶电泳图谱从正极到负极依次是A、LD1、LD2、LD3、LD5、LD4B、LD2、LD1、LD3、LD4、LD5C、LD3、LD1、LD2、LD4、LD5D、LD4、LD5、LD3、LD1、LD2E、LD1、LD2、LD3、LD4、LD57、一男性患者35岁，胸痛9天，血液分析示白细胞19.1×109、中性粒细胞85%，LDH同功酶电泳图谱出现LD1＞LD2反转变化，最有可能的诊断是A、AMIB、溶血性贫血C、巨细胞性贫血D、恶性肿瘤E、肌萎缩8、一男性患者51岁，大三阳，ALT956u/l、AST859u/l，LDH同功酶电泳图谱常出现哪条带增高A、LDH5B、LDH1C、LDH2D、LDH3E、LDH49、一患者52岁，血液分析示白细胞70×109/L，血片见大量幼稚粒细胞，LDH为1256U/L，LDH同功酶电泳图谱出现LDH3↑↑，最有可能的诊断是A、粒细胞性白血病B、溶血性贫血C、巨细胞性贫血D、急淋E、AMI10、以下测定哪种酶的标本不适于冰箱保存，而宜放置于室温25℃左右A、LDHB、ASTC、ALTD、ALPE、GGT人体精液中乳酸脱氢酶同工酶的相对活力测定及其应用1963年Blaneo和Goldlerg在人精液中发现了LDHx同工酶,该酶只存在于生精细胞和精子中,位于LDH4与5之间。从酶学方面的研究生育功能,国