ImageLab中文操作基础手册.doc

ImageLab™汉字操作手册FastandReliableImageLab全自动图像获取和分析软件用于MolecularImagerChemiDoc™XRS+、MolecularImagerGelDoc™XR+和CriterionStainFreeTM成像系统，可应用于凝胶电泳和转印膜数字成像和分析，而自动化工作步骤能加速图像获取步骤及参数优化，并针对调整好凝胶或转印膜影像进行系统性分析，进而得到所需分析数据结果。一、软件操作界面开启精灵程序桌面主窗口工具列分析工具列状态列1.主窗口工具列档案管理分析数据ResultsData2.显示工具列转换3D成模式像亮度明暗度转换改变图像色彩全窗口大小放大缩小图像显示设定图像信息3.分析工具列（1）图像工具（ImageTools）（2）泳道及条带工具（LaneandBandTools）（3）分子量工具（MWMolecularWeight）（4）自动定量工具（QuantityTools）（5）注释工具（AnnotationTools）（6）手动定量工具（VolumeTools）二、使用ImageLab软件进行化学发光图像获取步骤1.建立图像获取程序：在凝胶成像（GelImaging）对话框中选择Chemi（化学发光）应用程序在成像区域（ImagingArea）对话框中下拉式选单中选择适宜样品大小（非必需，能够后经过PositionGel选择）选择成像曝光（ImageExposure）方法，能够人为评定曝光时间并以手动设定（ManualExposure），或是使用信号累积模式（SignalAccumulationMode，SAM）来进行操作。在建立一个化学发光程序时最难任务就是图像曝光确实定，因为您想取得一个充足利用了相机大动态范围图像。过短图像曝光时间可能使高于膜背景微弱信号不能被识别；过长图像曝光时间能够使得一些条带饱和（也就是说，超出了相机正确汇报信号能力）。假如这是您第一次用ChemiDocXRS+分析化学发光样品，您需要在使用手控或信号累积模式（SAM）之前决定一个适宜成像时间框架。取得这个信息最好方法是取得一个相对短手工曝光并利用ImageLab里工具估量最适曝光时间。2.手动曝光选择手动设定曝光时间（Manuallysetexposuretime）并在读秒框中输入10秒。选择Highlightsaturatedpixels。把胶置于透射箱中心位置。在程序窗口中点击按钮。观察显示器中样品实时图像，打开照胶系统门并移动样品直到在视野中心区域。可利用摄影机变焦滑板调整成像区域大小。选择按钮取得你第一个图像。若所需图像出现在计算机显示器上，确定图像中是否包含红色饱和区域。若有饱和区域存在，请重新以较短曝光时间来获取图像。若无饱和区域存在，则可移动鼠标置于最暗条带之上，在较低右下角ImageLab窗口中观察信号强度数值。图中显示强度为1994，摄影机能统计最大值32分之一（最大值为65,535）。用你最初10秒曝光再乘以30就可在摄影机最大动态范围周围成像你样品。若你只需针对单一图像成像时间进行评定，可直接在手动曝光区域中输入300。3.信号累积模式（SignalAccumulationMode，SAM）假如预估方法不足以正确满足您目标，请选择SAM按钮，然后按Setup按钮。一个新对话框会跳出来，其包含有可输入细分成像时间领域。在这个例子中，我们已经输入了小于和大于我们原始300秒曝光估量时间，因为我们有理由相信正确成像时间将会在这些时间之中。我们总共想要5个成像，推测其中一个将会和最好成像极为靠近。一个您SAM设定图像显示出现在对话框里。而SAM设定影像显示对话窗口，在您选择按钮后再点选按钮，窗口会显示相关进度图标来说明整体图像获取时间。在250秒获取第一个图像，同时一个小缩略图会出现在窗口下方，以这类推整个过程将连续到获取全部图像。就像前面做过那样，经过移动鼠标在图像上，您能判定强度值。您也能够经过使用在程序窗口左边图像转换窗口（ImageTransform）中调整划片改变图像表观。在SAM程序中任何地方您全部能经过点击缩略图查看图像。若确定调整到符合您要求图像时，点击按钮舍弃其它不适合图像来完成获取图像程序。也可在SAM获取图像过程中或之以后保留需要全部图像，直接点选右键单点缩图窗口内图像即可进行存盘保留下来。在决定获取图像数量时，记住增加SAM图像会造成背景信号平均。当较多图像被取得时，在背景强度水平周围弱信号将会变得难以识别。假如分辨最弱信号很关键，我们推荐在适宜时间下取得单一成像。三、建立全自动图像获取及分析程序（CreatingProtocols）1.开启分析精灵窗口--STEP1.GELIMAGING（1）根据应用（NucleicAcid/Protein/Blots）