ImageLab中文操作手册.doc

ImageLab™中文操作手册FastandReliableImageLab全自动图像获取和分析软件用于MolecularImagerChemiDoc™XRS+、MolecularImagerGelDoc™XR+和CriterionStainFreeTM成像系统，可应用于凝胶电泳和转印膜的数字成像和分析，而自动化的工作流程能加速图像获取环节及参数优化，并针对调整好的凝胶或转印膜影像进行系统性分析，进而得到所需的分析数据结果。一、软件操作界面启动精灵程序桌面主窗口工具列分析工具列状态列1.主窗口工具列档案管理分析数据ResultsData2.显示工具列转换3D成模式像亮度明暗度转换改变图像色彩全窗口大小放大缩小图像显示设定图像信息3.分析工具列（1）图像工具（ImageTools）（2）泳道及条带工具（LaneandBandTools）（3）分子量工具（MWMolecularWeight）（4）自动定量工具（QuantityTools）（5）注释工具（AnnotationTools）（6）手动定量工具（VolumeTools）二、使用ImageLab软件进行化学发光图像获取流程1.建立图像获取程序：在凝胶成像（GelImaging）对话框中选择Chemi（化学发光）应用程序在成像区域（ImagingArea）对话框中的下拉式选单中选择合适的样品大小（非必需，可之后通过PositionGel选择）选择成像曝光（ImageExposure）方法，可以人为评估曝光时间并以手动设定（ManualExposure），或是使用信号累积模式（SignalAccumulationMode，SAM）来进行操作。在建立一个化学发光的程序时最难的任务就是图像曝光的拟定，由于您想获得一个充足运用了相机大的动态范围的图像。过短的图像曝光时间也许使高于膜背景的薄弱信号不能被辨认；过长的图像曝光时间可以使得某些条带饱和（也就是说，超过了相机准确报告信号的能力）。假如这是您第一次用ChemiDocXRS+分析化学发光样品，您需要在使用手控或信号累积模式（SAM）之前决定一个合适的成像时间框架。获得这个信息的最佳的方式是取得一个相对短的手工曝光并运用ImageLab里的工具估计最适的曝光时间。2.手动曝光选择手动设定曝光时间（Manuallysetexposuretime）并在读秒框中输入10秒。选择Highlightsaturatedpixels。把胶置于透射箱的中心位置。在程序窗口中点击按钮。观测显示器中样品的实时图像，打开照胶系统的门并移动样品直到位于视野的中心区域。可运用照相机的变焦滑板调节成像区域的大小。选择按钮获得你的第一个图像。若所需的图像出现在计算机的显示器上，确认图像中是否包含红色的饱和区域。若有饱和区域存在，请重新以较短的曝光时间来获取图像。若无饱和区域存在，则可移动鼠标置于最暗的条带之上，在较低的右下角ImageLab窗口中观测信号的强度数值。如图中显示强度为1994，照相机能记录的最大值的32分之一（最大值为65,535）。用你的最初的10秒曝光再乘以30就可在照相机的最大动态范围附近成像你的样品。若你只需针对单一图像的成像时间进行评估，可直接在手动曝光区域中输入300。3.信号累积模式（SignalAccumulationMode，SAM）假如预估方法局限性以精确满足您的目的，请选择SAM按钮，然后按Setup按钮。一个新的对话框会跳出来，其包具有可输入细分的成像时间的领域。在这个例子中，我们已经输入了小于和大于我们原始的300秒曝光估计时间，由于我们有理由相信准确的成像时间将会在这些时间之中。我们总共想要5个成像，推测其中一个将会与最佳成像极为接近。一个您的SAM设定的图像显示出现在对话框里。而SAM设定的影像显示对话窗口，在您选择按钮后再点选按钮，窗口会显示相关进度图标来说明整体图像获取的时间。在250秒获取第一个图像，同时一个小的缩略图会出现在窗口的下方，以此类推整个过程将连续到获取所有的图像。就像前面做过的那样，通过移动鼠标在图像上，您能鉴定强度值。您也可以通过使用位于程序窗口左边的图像转换窗口（ImageTransform）中的调节划片改变图像的表观。在SAM程序中的任何地方您都能通过点击缩略图查看图像。若拟定调整到符合您规定的图像时，点击按钮舍弃其它不适合的图像来完毕获取图像的程序。也可在SAM获取图像的过程中或之后来保存需要的所有图像，直接点选右键单点缩图窗口内的图像即可进行存盘保存下来。在决定获取图像的数量时，记住增长SAM图像会导致背景信号的平均。当较多的图像被获得时，在背景强度水平附近的弱的信号将会变得难以辨认。假如辨别最弱的信号很重要，我们推荐在合适的时间下获得单一的成像。三、建立全自动图像获取及分析程序（Crea