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第8章酶学概论二.酶是催化剂EnzymesDONOTAltertheEquilibriumConstant思考题3.是非题酶可以降低生化反应的活化能,因此可以改变反应的平衡常数。O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶2.酶作为生物催化剂的特性思考题酶催化剂的特点(续)酶催化剂的特点(续)酶催化剂的特点(续)思考三、酶的化学本质及其组成(二)酶的化学组成辅酶(coenzyme):与酶蛋白结合较松,可透析或超过滤除去。(例如:NADNADP)辅基(prostheticgroup):与酶蛋白结合较紧。不可透析或超过滤除去(FAD)为什么必须将丙酮酸还原为乳酸?WhyshouldNAD+berecycled?全酶才有催化活性辅助因子某些维生素与辅酶Coenzymes&Metabolism1、单体酶:由一条或多条共价相连的肽链组成的酶分子牛胰RNase124a.a单链鸡卵清溶菌酶129a.a单链胰凝乳蛋白酶三条肽链2、寡聚酶:由多个相同或不同亚基以非共价键连接的酶亚基之间以非共价键结合。①含相同亚基的寡聚酶:苹果酸脱氢酶(鼠肝)2个②含不同亚基的寡聚酶:乳酸脱氢酶4个亚基★大多数寡聚酶是胞内酶,而胞外酶一般是单体酶。3.多酶复合体(multienzymecomplex):若干个功能相关的酶缔合形成的结构和功能实体,催化细胞代谢中一个连续反应体系。其中每一个酶催化一个反应,所有反应依次进行,构成一个代谢途径或代谢途径的一部分。有利于化学反应的进行,以提高酶的催化效率,同时便于机体对酶的调控。如:丙酮酸脱氢酶系多酶复合体多酶复合体多酶复合体4、多酶融合体(多功能酶、串联酶)大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅲ大肠杆菌的DNA聚合酶Ⅰ四、酶的命名与编号系统命名酶的国际系统分类法及编号(EC编号)1.氧化还原酶类:催化氧化还原反应(最大的一类酶)通式:AH2+B→BH2+A其中:A为质子供体,B为质子受体如:乳酸脱氢酶催化的反应:乳酸+NAD+→丙酮酸+NADH22.转移酶类:催化底物之间基团的转移反应.通式:AR+B→BR+A其中:R为转移基团,R不为2H如:己糖激酶、转氨酶、脂酰转移酶、糖基转移酶等酶的国际分类酶的国际分类酶的国际分类氨基酸+ATP+tRNA→氨基酰-tRNA+AMP+ppi碳酸酐酶催化反应CO2+H2O→H2CO3,则此酶属于:()A.水解酶B.转移酶C.裂合酶D.合成酶比较需氧和不需氧脱氢酶异同?(2).不需氧脱氢酶(最重要)1、下列哪种酶属需氧脱氢酶?A、乳酸脱氢酶B、L-氨基酸氧化酶C、琥珀酸脱氢酶D、NADH脱氢酶E、苹果酸脱氢酶上海交通大学2004年生物化学试题3、细胞色素aa3的重要特点是A、可使电子直接传递给氧分子的细胞色素氧化酶B、以铁卟啉为辅基的递氢体C、是递电子的不需氧脱氢酶D、是分子中含铜的递氢体E、含有核黄素中山大学医学院硕士生物化学试题(2002)酶的国际命名五、酶的专一性(一)、酶的专一性类型(2)相对专一性(relativespecificity)SpecificPeptideCleavageReactions2.立体异构专一性(二)酶作用专一性假说2、诱导契合学说(induced-fithypothesis)认为酶与底物的结合处至少有三个点,而且只有一种情况是完全结合的形式。只有这种情况下,不对称催化作用才能实现。酶能区分从有机化学观点来看是属于对称分子中两个等同的基团,只催化其中的一个基团,而不催化另一个。六、酶的活力测定与分离纯化反应初速率的概念及其条件(1)[S]远大于[E]:[S]在5Km以上,并非越多越好初速度与[S]呈零级反应初速度与[E]呈一级反应(2)外界条件:最佳温度、最佳PH、最佳离子强度(3)反应体系有适宜的辅助因子、激活剂酶的活力测定2.活力单位酶的活力单位(U)(表示酶量多少)酶的比活力Specificactivity定义:每毫克酶蛋白所具有的酶活力。(有时用每毫升)单位:U/mg蛋白质。酶的比活力是分析酶纯度的重要指标。比活力=活力U/mg蛋白=总活力U/总蛋白mg思考题思考题思考题-课后题(13)思考题思考题思考题思考题思考题思考题1.化学反应的速率及其测定:测产物分光光度法测乳酸脱氢酶活力(二)、酶的分离纯化P337总活力=活力单位数/ml酶液×总体积(ml)比活力=活力单位数/ml蛋白(氮)=总活力单位数/总蛋白(氮)mg纯化倍数=回收率(产率)=───────×100%蛋白质纯化的一般注意事项蛋白质纯化的一般注意事项思考题酶的活力测定思考题(课后11)思考题(课后11)12.焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解或磷酸,其相对分子质量为120×103,由6个相同亚基组成。纯酶的Vmax为2800U/mg酶。它的一个活力单位规定为:在标准测定条件下,37℃、15min内水解10μmol焦磷酸所