液相色谱质谱联用.pptx

水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物的检测背景􀁺各国的管理要求Codex：无规定国际食品动物养殖业禁用药物美国、欧盟、加拿大、日本、英国、泰國、新加坡等许多国家已将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。欧盟（2004/25/EC）以2μg/kg（MG＋LMG总量）为执行限（MRPL），对象：水产品及其制品；中国：于2002年5月将MG列入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中，禁用于所有食品动物。农业部第235号公告规定孔雀石绿的限量值(执行限）为0.5μg/kg（GB/T20361-2006MG总量的LOD为0.5μg/kg）,来自《农业部2007年城市水产品质量安全例行监测方案》。MG及其类似物CV孔雀石绿：(MG：孔雀石绿(MG,又名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿)是一种带有金属光泽的绿色结晶体，属三苯甲烷类染料)分子式：C23H25ClN2，分子量：364.92。隐形孔雀石绿（LMG）：分子式C23H26N2，分子量：330。具有光泽的结晶粉末，不易挥发，极易溶于水，水溶液呈兰绿色(4.0g/100ml)。能溶于乙醇、甲醇或戌醇。结晶紫（CrystalViolet，CV）：分子式：C25H30N3Cl，分子量407.98，熔点175℃-180℃。隐色结晶紫（LeucoCrystalViolet，LCV）：分子式：C25H31N3，分子量373.54，白色结晶粉末，熔点≧177℃。孔雀石绿及其类似物LC/MS/MS的质谱确证法液相色谱条件：色谱柱:安捷伦ZORBAXEclipseplusC18柱（2.1×100mm3.5-micron）流动相：乙腈-5mmol/L乙酸铵梯度洗脱流速:0.4ml/min。柱温：40℃进样量：10μL质谱条件质谱扫描方式：多反应离子检测模式（MRM)标准溶液的配制a)标准储备液：孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫各0.0100g分别用甲醇溶解并定容至10mL，浓度为1mg/mL，-18℃冰箱保存,有效期12个月b)内标物：D6-孔雀石绿（100ug/ml）、D6-无色孔雀石绿（100ug/ml）c)基质加标标准工作曲线的制备：将标准储备液混合用初始流动相逐级稀释成0.1μg/L～10.0μg/L流动相的配制:5mmol/L乙酸铵:称取0.385g乙酸铵，加水至1000mL，加乙酸5滴，精密pH试纸在4.5左右。乙腈（色谱纯）c）初始流动相配比：乙腈+5mmol/L乙酸铵=75+25操作步骤（提取、净化）分析结果孔雀石绿MRM色谱图无色结晶紫MRM色谱图加标鱼样品提取物的MRM色谱图1.0ng/g孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫标准系列0.2-2.0ng/g动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法β-受体激动剂结构、分类方法原理、适用范围质谱条件色谱条件质谱参数样品提取过程净化流程图定容液的选择结果分析（0.5-5.0ppb）基质加标2.0ppb线性范围0.5-5.0ppb注意事项动物性食品中硝基呋喃及其代谢产物残留量检测背景几年前在畜牧、水产养殖中被广泛应用，后来研究发现，硝基呋喃类药物及其代谢物在动物源性食品中的残留可以通过食物链传递给人类。呋喃它酮有强致癌性，呋喃唑酮有中度致癌性，硝基呋喃类化合物是直接致变剂，它不用附加外源性激活系统就可以引起细菌的突变。硝基呋喃类药物在体内代谢迅速，代谢的部分化合物分子与细胞膜蛋白结合成为结合态，结合态可长期保持稳定，从而延缓药物在体内的消除速度。这些代谢物可以在弱酸性条件下从蛋白质中释放出来，因此，当人类吃了含有硝基呋喃类抗生素残留的食品，这些代谢物就可以在人类胃液的酸性条件下从蛋白质中释放出来被人体吸收而对人类健康造成危害。限量要求方法原理质谱条件色谱条件质谱扫描方式：多反应离子检测模式（MRM）动物性食品中硝基呋喃及其代谢产物残留量的LC-MS-MS标准操作程序酶解过程净化过程分析结果（0.5-5.0ppb）线性范围0.5-5.0ppb加标8.0ppb注意事项谢谢大家