细胞的程序化死亡.pptx

Chapter1212.1Cellularaging体外培养人的成纤维细胞，在体外分裂次数有限，证明细胞不是不死的将老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞同时培养，年轻状态的细胞在体外分裂次数更多，说明衰老与供体细胞的年纪有关老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞进行混合和单独培养比较实验，发现二者的分裂次数没有变化，说明与培养的环境无关利用细胞杂交的方法确定引起衰老的真正原因。年轻的胞质体与年老的完整细胞融合，杂种细胞不能分裂；年老的胞质体与年轻的完整细胞融合，杂种细胞分裂能力与年轻相同，证明细胞核是导致衰老的真正原因Humanfibroblastculturedinvitro早老症儿童与正常儿童的比较12.1.1衰老细胞的特征细胞衰老的分子机理遗传论学派3、衰老基因学说•子女的寿命与双亲的寿命有关；•各种动物都有相当恒定的平均寿命和最高寿命；–成人早衰症：平均39岁时出现衰老，47岁生命结束；–婴幼儿早衰症：1岁时出现明显的衰老，12~18岁生命结束，–早衰症患者体内解旋酶发生突变。–Caenrhabditiselegans的平均寿命仅3.5天，该虫age-1单基因突变，可提高平均寿命65%，提高最大寿命110%。自由基攻击细胞的证据12.2PCD(programcelldeath)Death2002年诺贝尔生理学或医学奖英国科学家悉尼·布伦纳（SydneyBrenner）英国科学家约翰·苏尔斯顿（JohnE.Sulston）美国科学家罗伯特·霍维茨（H.RobertHorvitz）◆2002年的诺贝尔生理学和医学奖授予了在器官发育和程序性细胞死亡研究领域中做出奠基性贡献的3位科学家:●英国的Brenner、Sulston和美国的Horvitz●他们创造性地用线虫作为实验模型,实现了对器官发育过程中细胞分裂、分化的原位观察,完成了细胞图谱的绘制,●在此基础上发现并研究了调控器官发育程序性细胞死亡的关键基因及其功能并进一步在高等哺乳动物中发现了相关功能基因。12.2.2NecrosisandapoptosisPCDNecrosisDNALADDER180～200bp细胞凋亡和细胞坏死的区别PCDregulatenervecellnumber1:形态学2:电泳方法3:DNATUNEL4:CaspaseactivityWesternblot5:Flowcytometricanalysis12.2.4Unravelmechanismofapoptosis12.2.4.1CED3/CASPASESCaspasesCaspasesregulateinmammalPCDgeneinC.elegansA受体介导的程序性细胞死亡途径NATUREREVIEWS|CANCERVOLUME2|APRIL2002|277Fas与配体（如TNF）结合发生三聚化，使胞内的DD区（Deathdomain）与接头蛋白FADD的DD区结合。FADD－N端通过DED区（deatheffectordomain）与Caspase-8前体结合，Caspase-8通过自剪接激活。Caspase-8引起caspase级联反应，激活Caspase-3、6、7。Caspase可降解结构蛋白、信号蛋白、转录调控蛋白、周期蛋白等等。胞外信号分子诱导的细胞凋亡途径小结12.2.4.2CED4/Apaf1B细胞内源信号激发细胞程序性死亡12.2.4.3Bcl-2家族与细胞凋亡Bcl-2对线粒体功能的调控抑制凋亡蛋白：Bcl-2、Bcl-XL、Mc12、Bfe1、A1。促凋亡蛋白：Bax、Bcl-XS、Bad、Bak、Bik等，分布在线粒体外膜、核膜和内质网膜上P53Cell,Vol.108,153–164,January25,2002,Copyright.2002byCellPress