最新精编医学专题—细胞的程序化死亡.ppt

15.1细胞(xìbāo)的衰老体外培养人的成纤维细胞在体外分裂次数有限证明细胞不是不死的将老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞同时培养年轻状态的细胞在体外分裂次数更多说明衰老与供体细胞的年纪有关老年的人的成纤维细胞与年轻的人的成纤维细胞进行混合和单独培养比较实验发现二者的分裂次数没有变化说明与培养的环境无关利用细胞杂交的方法确定引起衰老的真正原因。年轻的胞质体与年老的完整(wánzhěng)细胞融合杂种细胞不能分裂；年老的胞质体与年轻的完整(wánzhěng)细胞融合杂种细胞分裂能力与年轻相同证明细胞核是导致衰老的真正原因人类(rénlèi)成纤维细胞离体培养早老症儿童(értóng)与正常儿童(értóng)的比较15.1.1衰老细胞(xìbāo)的特征细胞(xìbāo)衰老的分子机理遗传(yíchuán)论学派3、衰老基因学说•子女的寿命与双亲的寿命有关；•各种动物都有相当恒定(héngdìng)的平均寿命和最高寿命；–成人早衰症：平均39岁时出现衰老47岁生命结束；–婴幼儿早衰症：1岁时出现明显的衰老15~18岁生命结束–早衰症患者体内解旋酶发生突变。–Caenrhabditiselegans的平均寿命仅3.5天该虫age-1单基因突变可提高平均寿命65%提高最大寿命110%。自由基攻击细胞(xìbāo)的证据15.2程序性死亡(sǐwáng)PCD(programcelldeath)第十一页共四十四页。死亡(sǐwáng)2002年诺贝尔生理学或医学奖英国科学家悉尼(xīní)·布伦纳（SydneyBrenner）英国科学家约翰·苏尔斯顿（JohnE.Sulston）美国科学家罗伯特·霍维茨（H.RobertHorvitz）◆2002年的诺贝尔生理学和医学奖授予了在器官发育和程序性细胞死亡研究领域中做出奠基性贡献的3位科学家:●英国的Brenner、Sulston和美国的Horvitz●他们创造性地用线虫作为实验模型实现了对器官发育过程中细胞分裂、分化的原位观察完成了细胞图谱的绘制●在此基础上发现并研究了调控器官发育程序性细胞死亡的关键基因及其功能并进一步在高等(gāoděng)哺乳动物中发现了相关功能基因。Kerr（1972）最先提出与细胞坏死的区别是：①细胞通过出芽的方式形成许多凋亡小体；②凋亡小体内有结构完整的细胞器；③不引起炎症；④线粒体无明显形态(xíngtài)变化溶酶体活性不增加；⑤内切酶活化DNA有控降解凝胶电泳图谱呈梯状；⑥凋亡通常是生理性变化而细胞坏死是病理性变化。15.2.2坏死(huàisǐ)与凋亡坏死(huàisǐ)DNALADDER180～200bp细胞凋亡(diāowánɡ)和细胞坏死的区别PCD调控(diàokònɡ)神经细胞的数量1.形态学2.电泳(diànyǒnɡ)方法3.DNATUNEL第二十五页共四十四页。4.CaspaseactivityWesternblot第二十七页共四十四页。5.流式细胞仪分析(fēnxī)15.2.4揭开凋亡(diāowánɡ)的机制第三十页共四十四页。15.2.4.1CED3/CASPASESCaspasesCaspases在哺乳动物(bǔrǔdòngwù)中的调控PCDgeneinC.elegansA受体介导的程序性细胞(xìbāo)死亡途径NATUREREVIEWS|CANCERVOLUME2|APRIL2002|277Fas与配体（如TNF）结合发生三聚化使胞内的DD区（Deathdomain）与接头蛋白FADD的DD区结合。FADD－N端通过DED区（deatheffectordomain）与Caspase-8前体结合Caspase-8通过自剪接激活(jīhuó)。Caspase-8引起caspase级联反应激活Caspase-3、6、7。Caspase可降解结构蛋白、信号蛋白、转录调控蛋白、周期蛋白等等。胞外信号分子诱导的细胞凋亡(diāowánɡ)途径小结15.2.4.2CED4/Apaf1细胞(xìbāo)内源信号激发细胞(xìbāo)程序性死亡15.2.4.3Bcl-2家族(jiāzú)与细胞凋亡Bcl-2对线粒体功能的调控抑制凋亡蛋白(dànbái)：Bcl-2、Bcl-XL、Mc15、Bfe1、A1。促凋亡蛋白：Bax、Bcl-XS、Bad、Bak、Bik等分布在线粒体外膜、核膜和内质网膜上P53内容(nèiróng)总结