基因工程的基本操作程序-2021推选ppt.ppt

基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序为什么要有“目的基因的获取”这一步？真核细胞的基因结构目的基因主要是______________________，也可以是一些具有调控作用的因子繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对少DNA在高温下变性解旋为什么要有“表达载体的构建”这一步？将目的基因导入受体细胞2、下列属于获取目的基因的方法的是()构建基因文库只是获取目的基因的方法之一。表达载体与感受态细胞混合利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？模板DNA(需含有目的基因)（3）目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；与DNA模板结合，形成局部________。与DNA模板结合，形成局部________。细菌的检测，将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。上是否插入了目的基因在生物____复制___________的核酸合成技术将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。2.基因文库的分类:按外源DNA片段的来源分类3、基因文库的构建基因组DNA文库真核生物转录过程文库类型村长,为什么要构建基因文库？直接从含有目的基因的生物中提取不行吗？？？1、概念：PCR全称为_______________，是一项在生物____复制___________的核酸合成技术通过这项技术可在短时间内大量扩增目的基因因为整个过程是在体外进行，所以又叫做体外DNA扩增技术。四种脱氧核苷酸(dNTP)PCR扩增仪扩增过程PCR仪一次性吸液枪头利用PCR技术扩增目的基因通过DNA合成仪用化学方法人工合成为什么要有“表达载体的构建”这一步？基因表达载体的组成：启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质。方法农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物。Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞的染色体上基因枪法花粉管通道法显微注射法2.微生物作受体细胞原因：不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。如果显示出杂交带，就表明待测样品含有目的基因或目的基因已经转录。基因工程的基本操作程序思考：1.作为基因工程表达载体，只需含有目的基因就可以完成任务吗？为什么？（3）目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；（4）为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；（5）有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。2.根据农杆菌可将目的基因导入双子叶植物的机理,你能分析出不能导入单子叶植物的原因吗?若将一个抗病基因导入小麦中,理论上讲你应该怎样做?3.利用大肠杆菌可以生产出人的胰岛素，联系前面有关细胞器功能的知识，结合基因工程操作程序的基本思路，思考一下，若要生产人的糖蛋白，可以用大肠杆菌吗？（1）从小鼠中克隆出β-珠蛋白基因的编码序列（cDNA）。（2）将cDNA前接上在大肠杆菌中可以适用的启动子，另外加上抗四环素的基因，构建成一个表达载体。（3）将表达载体导入无四环素抗性的大肠杆菌中，然后在含有四环素的培养基上培养大肠杆菌。如果表达载体未进入大肠杆菌中，大肠杆菌会因不含有抗四环素基因而死掉；如果培养基上长出大肠杆菌菌落，则表明β-珠蛋白基因已进入其中。（4）培养进入了β-珠蛋白基因的大肠杆菌，收集菌体，破碎后从中提取β-珠蛋白。1.下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是3.细菌的质粒分子带有一个抗菌素抗性基因，该抗性基因在基因工程中的主要作用是A．提高受体细胞在自然环境中的耐药性B．有利于对目的基因是否导入进行检测C．增加质粒分子的分子量D．便于与外源基因连接4.有关基因工程的叙述正确的是A．限制酶只在获得目的基因时才用B．重组质粒的形成是在细胞内完成的C．质粒都可作为运载体D．蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料