《基因工程的基本操作程序》ppt.ppt

基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序一、目的基因的获取1、从基因文库中获取目的基因基因文库
（3）如何从基因文库中得到所需要的基因？（2）利用PCR技术扩增目的基因PCR技术过程：逆转录法1、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是
①从基因文库中获取目的基因②利用PCR技术扩增目的基因③反转录法④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成

A．①②③④B．①②③C．②③④ D．②③3、目的基因主要是指_______________的结构基因。获得目的基因的常见方法有三种：（1）从基因文库中获取目的基因，根据基因的_________序列，基因在________上的位置，基因的________产物mRNA，基因的_______产物蛋白质等获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因，该技术是一项在________完成的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成_________。（3）如果基因较小且核苷酸序列已知，可以通过____________方法。基因表达载体的作用：不可以。因为目的基因在表达载体中得到表达并发挥作用，还需要有其他控制元件，如启动子、终止子和标记基因等。必须构建上述元件的主要理由是：
（1）生物之间进行基因交流，只有使用受体生物自身基因的启动子才能比较有利于基因的表达；
（2）通过cDNA文库获得的目的基因没有启动子，只将编码序列导入受体生物中无法转录；
（3）目的基因是否导入受体生物中需要有筛选标记；
（4）为了增强目的基因的表达水平，往往还要增加一些其他调控元件，如增强子等；
（5）有时需要确定目的基因表达的产物存在于细胞的什么部位，往往要加上可以标识存在部位的基因（或做成目的基因与标识基因的融合基因），如绿色荧光蛋白基因等。2、基因表达载体的组成：启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质
终止子：位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断，能终止mRNA的转录
标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的细胞筛选出来（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。

（2）用___________切断目
的基因，使其产生_____
____________。1、下列关于基因表达载体的叙述不正确的是
A．启动子是与RNA聚合酶识别和结合的部位，是起始密码子
B．启动子和终止子都是特殊结构的DNA短片段，对mRNA的转录起调控作用
C．标记基因是为了鉴别受体细胞中是否有目的基因从而便于筛选
D．基因表达载体的构建视受体细胞及导入方式不同而有所差别(三)将目的基因导入受体细胞方法1、将目的基因导入植物细胞（2）基因枪法（3）花粉通道法2、将目的基因导入动物细胞
①方法：显微注射法
②程序：
3、将目的基因导入微生物细胞1、基因工程中科学家常用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是
A．结构简单、操作方便B．繁殖速度快
C．遗传物质含量少、简单D．性状稳定、变异少
2、基因工程常用的受体细胞有
①大肠杆菌②枯草杆菌③支原体④动植物细胞
A．①②③④B．①②③C．②③④D．①②④4.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是
①将毒素蛋白质注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵中④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，导入细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养
A．①②B．②③C．③④D．①④(四)目的基因的检测与鉴定知识延伸——DNA分子杂交技术返回1、用β-珠蛋白的DNA探针可以检测出的遗传病是
A．镰刀状细胞贫血症B．白血病
C．坏血病D．苯丙酮尿症思考与探究：4.β-珠蛋白是动物血红蛋白的重要组成成分。当它的成分异常时，动物有可能患某种疾病，如镰刀形细胞贫血症。假如让你用基因工程的方法，使大肠杆菌生产出鼠的β-珠蛋白，想一想，应如何进行设计？
复习题4）有关基因工程的叙述正确的是（）
A、限制酶只在获得目的基因时才用
B、重组质粒的形成在细胞内完成
C、质粒都可作为运载体
D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料1、目的基因可从基因文库中获得，下列有关基因文库的描述正确的是

A、某生物的全套基因就是一个基因文库
B、将含有某种生物不同的许多DNA片段，导入某个生物体内，则这个生物就是一个基因文库
C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库
D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库5）基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是
A、人工合成目的基