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基因工程及其应用课时能发光的水母能发荧光的热带斑马鱼请您欣赏能产生人胰岛素的大肠杆菌基因“嫁接”一、基因工程（一）概念：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。培育转基因大肠杆菌的简要过程：⑴环境监测：基因工程做成的DNA探针能够十分灵敏地检测环境中的病毒、细菌等污染。即：生成磷酸二酯键使其价格降低了30%-50%!细菌的基因只存在于质粒上C.使其价格降低了30%-50%!阅读课本Ｐ１０５讨论：转基因食品安全吗？例：大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)能识别3、基因工程与环境保护从正常人的基因组中分离出DNA与DNA芯片杂交就可以得出标准图谱；2、基因工程在医学上的应用AATTC目的基因导入受体细胞SmaⅠ限制性内切酶（EcoRⅠ）作用过程被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？2、基因的“针线”——DNA连接酶连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。连接的部位：相邻的两个脱氧核苷酸的切口，即：生成磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程：作为运载体必须具备哪些条件？（4）与DNA有关酶的作用DNA酶：即DNA水解酶，可以将DNA水解成脱氧核苷酸。DNA聚合酶：在DNA复制的过程中，连接单个游离的脱氧核苷酸到DNA片段上，需要模板。DNA连接酶：连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键，不需要模板。解旋酶：在DNA复制时，破坏氢键，使DNA双链打开。限制性核酸内切酶：破坏脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。例1、已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指｡如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段｡现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是()A.3B.4C.9D.12DNA连接酶：连接两个DNA片段，形成磷酸二酯键，不需要模板。大量的受体细胞接受不多的目的基因。3）将目的基因导入受体细胞能否让热带鱼也能发光?根据已知的氨基酸序列合成DNA处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。转基因植物的安全性争论原理：DNA分子杂交（碱基互补配对）3、质粒是基因工程最常用的运载体,有关质粒的说法正确的是()A.所以一般不适用于真核细胞的基因。GAATTC序列，并在G和A之间切开。我国研究人员正在制备用于基因治疗的基因工程细胞原理：DNA分子杂交（碱基互补配对）如虫吃后中毒死亡，则说明摄入了抗虫基因并得到表达。条件:（1）必须是单链；人造血液、白细胞介素、乙肝疫苗等通过基因工程实现工业化生产，均为解除人类的病苦，提高人类的健康水平发挥了重大的作用。若将生物合成相应药物成分的基因导入微生物细胞内，让它们产生相应的药物，不但能解决产量问题，还能大大降低生产成本。3、质粒是基因工程最常用的运载体,有关质粒的说法正确的是()A.质粒不仅存在于细菌中,某些病毒也具有B.细菌的基因只存在于质粒上C.质粒为小型环状DNA分子,存在于拟核(或细胞核)外的细胞质基质中D.质粒是基因工程中的重要工具酶之一4、下列关于DNA连接酶的作用叙述,正确的是()A.将单个核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯键B.将断开的两个DNA片段的骨架连接起来,重新形成磷酸二酯键C.连接两条DNA链上碱基之间的氢键D.只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来,而不能将双链DNA片段末端之间进行连接二、基因工程的操作步骤从细胞中分离出DNA四个基本步骤：1.目的基因的提取方法⑵人工合成基因法1）反转录法：利用PCR技术扩增目的基因质粒用与提取目的基因相同的限制酶切割质粒使之出现一个切口，将目的基因插入切口处，让目的基因的黏性末端与切口上的黏性末端互补配对后，在连拉酶的作用下连接形成重组DNA分子。常用的受体细胞：大量的受体细胞接受不多的目的基因。处理的受体细胞中真正摄入了目的基因的很少，必须将它从中检测出来。将每个受体细胞单独培养形成菌落，检测菌落中是否有目的基因的表达产物。淘汰无表达产物的菌落，保留有表达产物的进一步培养、研究。受体细胞摄入DNA分子后就说明目的基因完成了表达吗？技法提炼基因工程操作的归纳总结集训真题·体验高考A4.用基因工程技术可使大肠杆菌合成人的蛋白质。下列叙述不正确的是()A.常用相同的限制性核酸内切酶处理目的基因和质粒B.DNA连接酶和RNA聚合酶是构建重组质粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D.导入大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达5.利用