基因工程的基本操作程序教学案【实用文档】doc.doc

基因工程的基本操作程序教学案【实用文档】doc文档可直接使用可编辑，欢迎下载１。2基因工程的基本操作程序【课标要求】1.简述基因工程基本操作程序的四个步骤2．尝试设计某一转基因生物的研制过程。【本节重难点】重点：基因工程基本操作程序的四个步骤难点：（1）从基因文库中获取目的基因(2)利用PCＲ技术扩增目的基因【学习过程】一、基因工程的基本操作程序简述①目的基因的；②的构建;③将目的基因；④目的基因的。二、基因工程的基本操作程序(一)目的基因的获取1．目的基因:主要是指的基因,也可以是一些具有作用的因子。2.原核细胞和真核细胞的基因结构（１)原核细胞的基因结构（2）真核细胞的基因结构3．目的基因的获取目的基因可以从中分离出来，也可以用合成。常用的方法有以下几种：（1）从基因文库中获取目的基因①基因组文库和部分基因文库（如ｃDＮＡ文库）基因组文库cDNA文库文库类型cDNA文库基因组文库文库大小基因中启动子基因中内含子基因多少物种间的基因交流②从基因文库中得到目的基因，可以根据一些信息，如根据基因的、基因的、基因在染色体上的、基因的,以及基因的等特性。（2）利用PCR技术扩增目的基因①PCR是＿__________＿___＿__＿________＿__＿__＿＿＿技术，是的缩写。②原理：______＿__＿＿_____＿__＿。,③前提：有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成__＿__＿＿__.④条件:DNＡ模板、。⑤扩增过程：a．变性(℃):目的基因DＮA受热变性后接连为单链b.退火（℃）：与单链相应互补序列结合c．延伸（℃):在的作用下进行延伸Taｑ酶的特点是。PCR技术与DNA复制的比较：PCＲ技术ＤNＡ复制相同点原理原料条件不同点解旋方式场所酶结果（3)化学法直接合成适用于基因比较,核苷酸序列又。(二）——基因工程的核心１。基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中能，并且可以,同时，使目的基因能够.２．基因表达载体＝+++（1）启动子：是一段有特殊结构的,位于基因的,它是识别和结合的部位，有了它才能驱动基因，最终获得所需要的蛋白质。（2)终止子:也是一段有特殊结构的，位于基因的，相当于一盏红色信号灯，使在所需要的地方停止下来。(3）标记基因：作用是为了，从而将含有目的基因的细胞出来,如基因。３．构建基因表达载体的过程:用（同、不同）种限制酶去切目的基因与运载体，再用使其连接，形成重组DNA分子。(三）将目的基因导入受体细胞将目的基因受体细胞，并且在受体细胞内和的过程，称为转化.(1）将目的基因导入植物细胞①农杆菌转化法②法③法（２)将目的基因导入动物细胞①技术是将目的基因导入受体细胞的最有效方法.②操作程序：将含有目的基因的表达载体→→获得→显微注射→胚胎→胚胎→发育成具有新性状的动物（3）将目的基因导入微生物细胞①原核生物作为基因工程受体细胞的优点：。②大肠杆菌细胞最常用的方法:a.用处理细胞，使细胞处于一种的生理状态，这种细胞称为细胞；b．将分子溶于缓冲液与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收ＤNＡ分子.(四)目的基因的检测与鉴定（1）检测转基因生物的上是否插入了目的基因检测方法:技术，即将转基因生物的基因组DNＡ提取出来，在含有目的基因的DNＡ片段上用放射性同位素等作标记,以此作为，使探针与基因组ＤNＡ杂交，如果出现，就表明目的基因已插入染色体DNA中。(2）检测目的基因是否检测方法:技术（3）检测目的基因是否检测方法:，从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行检测，若有出现,表明目的基因已形成蛋白质产品。(４）进行水平的鉴定【巩固练习】1.下列正确表示基因操作“四部曲”的是()Ａ.提取目的基因→目的基因导入受体细胞→基因表达载体的构建→目的基因的检测和鉴定B．目的基因的检测和鉴定→提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞C．提取目的基因→基因表达载体的构建→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定D．基因表达载体的构建→提取目的基因→目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和鉴定２。下列不属于获得目的基因的方法的是（）A。利用ＤNＡ连接酶复制目的基因B．利用DＮＡ聚合酶复制目的基因C．从基因文库中获取目的基因D。利用PCR技术扩增目的基因3。PCR技术扩增DNＡ，需要的条件是(）①目的基因②ＡTP③四种脱氧核苷酸④ＤNA聚合酶等⑤mRＮA⑥核糖体A。①②③④B．②③④⑤Ｃ。①③④⑤Ｄ．①②③⑥4.根据ｍＲNA的信息推出获取目的基因的方法是（）Ａ．用DNA探针测出目的基因Ｂ．用mＲNA探针测出目的基因C。用mRＮA反转录形成目的基因D．用PCR技术扩增mRＮA５。在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是(）A．用mRNＡ为模板逆转录合成ＤＮＡＢ.以4