海洋病毒专题知识讲座.pptx

海洋病毒专题知识讲座传统海洋病毒学海洋病毒荧光染色(SYBRGreenIstain25)(1998.5.加利福利亚SantaCatalina岛附近5m海水)一、海洋病毒介绍1、海洋生物多样性2、海洋病毒生态各种海洋生物丰度3、海洋中病毒种类４、海洋病毒存在方式海水中噬菌体A,B:MyoviridaeC,D,E:SiphoviridaeF:Podoviridae.Bar=100nm.(自ProctorLM.1997.MicroscResTech.37(2):136～161)细菌丰度与病毒丰度相关性到达67%藻类病毒５、海洋病毒生态６、海洋病毒生态效应异养微生物（１）病毒影响光合作用（２）病毒在海洋生物间基因转移海洋病毒这种能力动摇了咱们对微观世界认识。海洋病毒多样性研究存在巨大困难二、海洋生物疾病病毒生态２、病毒与海水养殖容纳量三、变异与新病毒发生四、海洋病毒综合利用五、海洋病毒生态学关键技术3、病毒定量测定在海洋病毒定量研究方面,主要有噬菌斑计数法(PFU)、透射电镜技术(TEM)、表面荧光显微技术(EIPFM)和流式细胞计数仪计数(FCM)等方法。六、研究需求与展望7研究实例1淋巴囊肿病被淋巴囊肿病毒感染、并表现经典病症牙鲆。图１示体表、鳍小疱状肿胀物被淋巴囊肿病毒感染、并表现经典病症鲈鱼。7.1淋巴囊肿病介绍淋巴囊肿病是1874年发觉，当初认为是原虫引发。1962年发觉病毒粒子，1966年从鱼类成纤维细胞中分离出病原性病毒而得到证实。该病毒是网箱或工厂化养鱼常见病，主要见于1龄鱼类，体长20-30cm，体重100-160g。病原:淋巴囊肿病毒粒子为正二十面体，大者200-250nm，小130-150nm。可引发细胞病变，产生细胞质包涵体。7.2淋巴囊肿病组织学特征牙鲆淋巴囊肿病毒中国分离株(lymphocystisdiseasevirusisolatedfromChina,LCDV-C)体外感染显微图片。显示LCDV-C可在草鱼细胞(GCO)中增殖，并形成病变斑。(A)正常GCO对照细胞。(B)LCDV-C接种1天后，GCO细胞改变。©LCDV-C接种了3天后，在单层GCO细胞中形成病变斑。7.3淋巴囊肿病细胞学特征LCDV-C感染GCO细胞电镜照片。(A)显示细胞中染色体固缩、形成空泡。(B)主要显示核碎裂。LCDV-C在GCO细胞中引发病变显微照片。A、C、E为正常对照细胞；A、B由Giemsa染色(100)，C、D、E和F由Hoechest33258染色(200)；A、B、C、D为普通光镜观察，E、F为荧光显微镜观察。7.4淋巴囊肿病病状和诊疗病理学特征:在鱼体表和鳍上出现大小不一、呈白色、灰色、粉红色乳头状肿瘤状物，这些肿胀物有各个分散，也有聚集成团或联成片，严重患者密布于全身皮肤。囊肿细胞大小普通为0.1-0.5毫米，大者可达1毫米以上。除发生在鱼体表外，鳃、咽喉、肠壁、肠系膜、肝、脾、卵巢等器官上也可能出现。除引发鱼外行难看外，还可造成鱼免疫能力下降。肿瘤破裂时形成溃疡面，引发寄生虫、细菌等继发性感染。病症较轻时，可自愈，2龄以上鱼感染此病概率小。临诊:依据外观病状进行诊疗和抗原-抗体反应。7.5流行情况此病在10月至翌年5月，水温10—25摄氏度时为流行高峰期，在我国整年均可发生。网箱养殖感染率可达60％以上，池塘为20％—27％。此病在2龄以上鱼，普通不引发死亡，但鱼体较瘦，外表难看，失去商品价值；有病鱼囊肿可脱落自愈。对1龄幼鱼可引发死亡，发病后两个月内死亡率可达30％,甚至到80%7.6防治方法:（1）人工繁殖用亲鱼应严格检疫，确保为无病毒感染健康鱼；不购置带有淋巴囊肿病毒病症苗种鱼进行养殖。（2）对发病养殖网箱或鱼池实施隔离，捞除病鱼并销毁；泼洒消毒剂和投喂抗菌药饵，预防继发性感染。海洋病毒专题知识讲座7.7当前研究内容快速监测：以利于选择无病毒亲鱼可利用各种细胞系来培养病毒，方便进行研究，或制作弱毒或无毒疫苗研究抗体结构，怎样提升其免疫能力。研究防治：对感染病鱼怎样进行治疗。8研究实例2对虾白斑病毒8.2对虾病毒种类5种病毒引发对虾个体病状、组织病理学相同。主要感染对虾皮下组织、造血组织和结缔组织等。患病对虾头胸甲内表面都有肉眼可辨透明十分显著白斑，外胚层全部组织都受到感染；病虾肝胰腺肿大发白；感染细胞有经典核肿大，不形成核形多角体或颗粒类包涵体。肠上皮、真皮和鳃等病变细胞占到60-90%，造血组织细胞病变率在40-70%，有组织细胞核无病变现象。同属于杆状病毒科无包涵体型杆状病毒亚群。统称白斑综合症病毒（WSSV）1992年，在台湾北部日本对虾中暴发，2-7天累计死亡率为100%。1993年在斑节对虾中也发觉了白斑综合症，电镜下观察为无包涵体杆状病毒粒子。为dsDNA,用HindⅢ酶切，最少可取得