新版病毒专题知识讲座.pptx

一、病毒发觉:1935年美国生物学家斯坦莱(W.M.Stanley)从烟草花叶病病叶中提取出了病毒结晶，并证实该结晶含有致病力。这一事件成为分子生物学发展中一个里程碑。斯坦莱也所以而荣获诺贝尔奖。随即鲍顿(FrederickCharlesBawden)和皮里(NormanW.Pirie)这两位英国生物化学家证实了病毒结晶含有核酸和蛋白质两种成份，而只有核酸含有感染和复制能力。1971年Diener发觉了一个只含小分子量RNA而不含蛋白质类病毒（viriods）,说明自然界中存在着比病毒更简单致病因子，这一发觉对病毒定义提出了挑战。1981年至1983年，又发觉在四种多面体RNA病毒颗粒中伴随存在一个与类病毒相同RNA分子，其复制和衣壳化都需要依赖于辅助病毒，被称为卫星病毒或拟病毒（virusiods）。1982年Prusiner发觉引发羊瘙痒病病原体是一个分子量约27kDa蛋白质（不包含核酸）称为朊病毒（prions）。现在认为病毒是一个比较原始、有生命特征、能自我复制和专性细胞内寄生非细胞生物。植株感染病毒症状①个体极小，多在10-300nm之间，能经过细菌过滤器;②病毒没有细胞结构;③化学组成简单,主要是核酸和蛋白质；④只有DNA或RNA一个核酸。病毒向寄主细胞提供自己遗传信息，经过寄主转录、翻译和合成系统来复制病毒;⑤严格活细胞内寄生，无核糖体和独立酶反应系统；⑥在离体条件下，能以大分子状态存在，并可长久保持侵染活性；⑦对普通抗生素不敏感，但对干扰素敏感；一、病毒粒子形状与大小（二）病毒大小病毒结构示意图（一）病毒结构核衣壳（基本结构）关键：由DNA或RNA组成病衣壳：由许多衣壳粒蛋白组成毒包膜（非基本结构）：由类脂或脂蛋白组成刺突（非基本结构）（二）病毒对称性3．复合对称蝌蚪状病毒3、复合对称：蝌蚪形，如T4噬菌体。（三）病毒化学组成病毒主要化学组分为核酸（DNA或RNA）和蛋白质。有病毒还含有脂质、糖类等其它组分。动物病毒多数属DNA型，如天花病毒等，也有些属RNA型，如流感病毒等。植物病毒绝大多数属RNA型，少数属DNA型，如花椰菜花叶病毒。噬菌体多数属DNA型，少数属RNA型，如大肠杆菌噬菌体M13和f2等。2.病毒蛋白质3.脂类和多糖类：较复杂病毒如痘类病毒，在其被膜中含有脂类与多糖。脂类中磷脂占50-60%，其余则为胆固醇。多糖常以糖脂、糖蛋白形成存在。病毒所含糖类主要以糖蛋白形式存在于包膜表面，决定着病毒抗原性。四、病毒群体形态：（1）包含体：病毒在寄主细胞中形成聚集体称为包含体。其中包含未装配病毒亚基、完整病毒体和寄主编码蛋白质，多数为动物病毒和植物病毒所形成。包含体特点：有特定形态，多为圆形或多角型。体积较大，光学显微镜下可见。（2）噬菌斑：（3）空斑：一些动物病毒在动物细胞或组织培养系统培养时，因为受病毒感染细胞裂解出现与噬菌斑类似透明亮圈。假如是肿瘤病毒，细胞不是溶解，而是生长速率增加，造成受感染细胞堆积起来形成类似菌落感染病灶。（4）坏死斑（枯斑）：植物病毒在叶片等植物组织上形成一个个褪绿或坏死斑块。五、病毒分类依据寄主不一样划分为5种病毒依据化学成份划分为2种病毒依据对寄主影响程度划分为2种病毒第三节病毒繁殖—以噬菌体为例吸附侵入复制组装释放（一）吸附：吸附是指病毒经过其表面结构与宿主细胞病毒受体特异性结合，造成病毒附着于细胞表面过程。病毒体与细胞最初结合是可逆。病毒表面吸附蛋白能与细胞表面受体之间发生化学键结合，使得病毒不可逆地吸附于细胞表面。2、侵入过程：尾丝展开、释放溶菌酶、尾丝尾鞘收缩、DNA注入3、复制与合成(2)核酸转录(3)蛋白质合成4、装配噬菌体组装成熟病毒粒子从被感染细胞内转移到外界过程。没有包膜病毒合成溶解细胞酶，引发内裂解。有包膜病毒以下列图方式进行：包膜病毒包膜装配二、一步生长曲线（one-stepgrowthcurve）利用烈性噬菌体生活周期,能够在试验室条件下取得噬菌体生长曲线。这种用来测定噬菌体侵染和成熟病毒体释放时间间隔,并用以预计每个被侵染细胞释放出来新噬菌体粒子数量生长曲线称为一步生长曲线。高浓度敏感细菌＋适量噬菌体将低剂量噬菌体悬液加入敏感细菌培养液中,使得一个病毒体与10-100个细菌细胞相混合。经过短时间培养使噬菌体吸附在细菌上,再用抗体或稀释除去未吸附上噬菌体。用新鲜培养液把经过上述处理细菌悬液高倍稀释，以免发生第二次吸附和感染。培养后定时取样,将含有噬菌体样品与敏感细菌培养物混合培养,计算每个样品在培养基平板表面产生噬菌斑数目。以培养时间为横坐标,噬菌斑为纵坐标,能够绘出一步生长曲线。１．潜伏期：２．裂解期：３．平稳期：潜伏期:从噬菌体吸附菌细胞至菌细胞释出新噬菌体最短时间。裂解期（risephasse)—宿主裂解，噬菌体数不停增加时期。平稳期(pl