非细胞微生物病毒专家讲座.pptx

第四章非细胞微生物——病毒最早记载：狂犬病最早记载植物病毒病：郁金香碎花色病1884年，Chamberland创造了细菌过滤器1886年，Mayer发觉烟草花叶病1892年，俄国伊凡诺夫斯基发觉烟草花叶病原体滤过性1898年，荷兰贝杰林克证实烟草花叶病病原体是病毒1915年和1917年，托特和德爱莱尔分别发觉噬菌体1935年，斯坦利成功地取得了烟草花叶病毒结晶体非细胞微生物病毒专家讲座病毒（virus）：一类在活细胞内营专性寄生，没有细胞结构，但有遗传复制等生命特征，主要由核酸和蛋白质组成超显微非细胞生物。病毒与人类关系十分亲密造成各种动植物疾病，影响人类生产和生活植物病毒病：烟草花叶病、水稻矮缩症等动物病毒病：口蹄疫、禽流感等人类病毒病：狂犬病、流感、肝炎、艾滋病、天花等微生物病毒病：影响发酵工业促进生物科学和技术发展促进遗传学、微生物学、基因工程等学科发展非细胞微生物病毒专家讲座一、病毒特点5.严格活细胞内寄生，没有本身核糖体，没有个体生长，必须依赖宿主细胞进行本身核酸复制，形成子代。真病毒（Euvirus）病毒几乎能够感染全部细胞生物，并含有宿主特异性三、病毒形态和结构（一）病毒大小非细胞微生物病毒专家讲座球形颗粒(或称拟球形颗粒)病毒粒大量聚集并使宿主细胞发生病变时，就形成了含有一定形态、结构并能观察和识别特殊“群体”包涵体（inclusionbody）噬菌斑(plaque)枯斑(lesion)空斑(plaque)当噬菌体侵染细菌后会快速引发敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，最终在含有敏感细菌平板上出现肉眼可见空斑由植物病毒在植物叶片上形成局部坏死斑，称之为枯斑（lesion，病斑）。1.病毒粒子经典结构病毒粒子：专指成熟、结构完整和有感染性单个病毒，又称为毒粒。对称体制（1）螺旋对称及其代表——烟草花叶病毒由6390个核苷酸组成，每3个核苷酸与一个蛋白质亚基相结合有12个角、20个面、30条棱。衣壳由252个衣壳粒组成，包含（3）复合对称及其代表——T偶数噬菌体1.病毒核酸核酸是病毒遗传物质，含量1％－5％不等普通一个病毒毒粒只含有一个核酸核酸类型：DNA/RNA;ds/ss;线状/环状；闭环/缺口环等病毒核酸种类是病毒系统分类中最可靠分子基础蛋白质是病毒主要成份，占95%左右。功效：组成病毒粒子外壳，保护核酸；决定病毒感染特异性；组成病毒组成中酶分类：结构蛋白和非结构蛋白（3）其它成份：脂类、糖类、无机盐类繁殖方式：复制，一个特殊繁殖方式复制：病毒感染宿主细胞——病毒核酸进入细胞——复制与表示——产生子代病毒基因组和新蛋白质——装配——释放不存在个体生长过程！（1）吸附尾丝与宿主细胞表面受体结合刺突和基板固定非细胞微生物病毒专家讲座吸附量：每一个敏感细胞所能吸附对应噬菌体数量影响噬菌体吸附原因：内因：噬菌体量、特异性受体外因：温度、pH、阳离子等过程：尾鞘收缩——尾管插入宿主细胞——核酸注入宿主细胞——蛋白质外壳留在细胞外核酸复制和蛋白质合成过程(以E.coliT偶数系列噬菌体为例)宿主mRNA聚合酶——噬菌体mRNA——早期蛋白次早期mRNA聚合酶——噬菌体次早mRNA——次早期蛋白DNA聚合酶——新噬菌体DNA晚期mRNA聚合酶——晚期mRNA——晚期蛋白早期（early,immediateearly）（4）装配子代噬菌体成熟后，在脂肪酶和溶菌酶作用下，从细胞内部促进细胞裂解，实现噬菌体释放，宿主细胞死亡。裂解量：噬菌体侵入宿主细胞后，每个细胞最终能裂解释放出来噬菌体数量。自外裂解：非细胞微生物病毒专家讲座噬菌体效价：每毫升试样中所含有具侵染性噬菌体粒子数，亦是噬菌斑数量。噬菌斑测定方法：双层平板法双层平板法非细胞微生物病毒专家讲座定量描述烈性噬菌体生长规律试验曲线，以感染时间为横坐标，噬菌体效价为纵坐标。烈性噬菌体：侵染宿主细胞后，能在细胞体内形成大量子噬菌体，从而引发菌体细胞裂解死亡噬菌体。温和噬菌体：凡是吸附并入侵宿主细胞后，其DNA只是整合在宿主染色体上，并随宿主DNA复制而进行同时复制，普通不进行增殖和引发宿主细胞裂解噬菌体溶源性：温和噬菌体侵入宿主细胞后，将其基因组整合到宿主细胞基因组上，随宿主细胞复制而进行同时复制，不引发宿主细胞裂解现象。溶源菌：带有温和噬菌体基因组，并能正常生长繁殖而不被裂解宿主细胞称为溶源菌。三种状态：游离态、整合态、营养态最常见温和噬菌体：E.coliλ噬菌体λ噬菌体λ噬菌体溶源性反应将少许溶源菌与大量敏感性指示菌相混合，混匀后培养，会产生一个个中央有溶源菌小菌落、四面有透明圈特殊噬菌斑。亚病毒（subvirus）：在核酸和蛋白质两种成份中，只含其中一个成份分子病原体，包含类病毒、拟病毒和朊病毒3类。类病毒（viroid）是一类只含RNA、专