培养基灭菌及灭菌设备.ppt

培养基灭菌与空气净化第一节培养基灭菌一、灭菌的原理和方法用物理或化学方法杀死物料、容器、器具内外的病原微生物。一般只能杀死营养细胞而不能杀死细菌芽孢。例如巴氏消毒法是将物料加热至60℃维持30min以杀死不耐高温的微生物营养细胞。用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物包括营养细胞、细菌芽孢和孢子。灭菌条件：121℃20-30min。＊消毒不一定能达到灭菌要求而灭菌则可达到消毒的目的。关于灭菌和消毒的不正确的理解是（）A．灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、芽孢和孢子B．消毒和灭菌实质上是相同的C．接种环用灼烧法灭菌D．常用灭菌的方法有加热法、过滤法、紫外线法、化学药品法防腐（antisepsis）除菌的方法1.化学试剂灭菌法谷氨酸棒状杆菌的培养液常采用的灭菌方法是（）A．高压蒸汽灭菌B．高温灭菌C．加入抗生素灭菌D．酒精灭菌培养基的湿热灭菌将配制好的培养基同时放在发酵罐或其他装置中通入蒸汽将培养基和所用设备一起进行加热灭菌的过程也称实罐灭菌。发酵罐连续灭菌的流程与设备（3）维持罐使料液在灭菌温度下保持10min。因为：连消塔加热的时间很短光靠这段时间的灭菌是不够的；（4）冷却管使料液冷却到4050°C后（冷水喷淋）输送到预先灭菌过的罐内。连续灭菌过程中温度的变化(虚线)空气净化（除菌）发酵对空气无菌程度的要求一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3。空气除菌空气过滤除菌的原理与介质过滤除菌的种类绝对过滤：过滤介质的滤孔小于细胞和孢子。如聚乙烯醇缩甲醛树脂（PVF）制成的0.3m的微孔滤膜。深层介质过滤：介质的孔隙一般大于微生物细胞。如用棉花、玻璃纤维和颗粒活性炭填充的过滤器。深层介质过滤的原理1、惯性冲击作用：2、拦截滞留作用：3、布朗扩散：＜1um慢气流不规则直线运动4、重力沉降：重力>气流拖带力5、静电引力作用深层介质过滤的原理微粒随气流通过滤层时由于滤层纤维的层层阻碍使气流出现无数次改变运动速度和方向的绕流运动引起微粒与滤层纤维间产生惯性冲击、拦截、布朗扩散、重力沉降、静电引力等作用把微粒滞留在纤维表面上实现过滤的目的。空气过滤除菌介质发酵生产中制备无菌空气的大致过程空气过滤除菌流程空气压缩克服输送过程中过滤介质的阻力并维持一定的气流速度。空气贮罐紧接空压机安装消除压缩机排出空气量的脉冲维持稳定的空气压力。利用重力沉降作用除去部分油雾。压缩空气的冷却压缩后空气温度显著上升能引起过滤介质的炭化或燃烧增大发酵罐的降温负荷增加培养液水分的蒸发需冷却。压缩空气的除油除水冷却降温后的空气湿度增大会使过滤介质受潮失效。旋风分离器采用惯性拦截等机理有效去除空气中的水、油雾、尘埃不锈钢丝网可清洗使用寿命长。空气的加热将除油水的空气加热（温差在10～15°C左右）降低相对湿度（达50%～60%）后输入过滤器。发酵生产中制备无菌空气的大致过程为什么要进行空气的预处理？提高压缩前空气的洁净度去除压缩后空气中的油和水空气过滤器过滤除菌的关键设备发酵车间的空气过滤器空气净化的流程180M3发酵罐车间发酵设备——发酵罐发酵罐的类型鼓泡式反应器气升式反应器发酵控制Fermentationcontrol实验一产酶菌株的筛选定方案：首先要查阅资料了解所需菌种的生长培养特性。采样：有针对性地采集样品。增殖：人为地通过控制养分或培条件使所需菌种增殖培养后在数量上占优势。分离：利用分离技术得到纯种。发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。（一）采样2、采样季节：以温度适中雨量不多的秋初为好。3、采土方式：在选好适当地点后用小萨子除去表土取离地面5-15cm处的土约10g盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中扎好标记记录采样时间、地点、环境条件等以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化宜将样品逐步分批寄回以便及时分离。（二）增殖培养（三）培养分离（四）筛选（五）毒性试验