薄层色谱方法对通络化浊丸中三七的鉴别方案设计.pdf

设计作品名称薄层色谱方法对通络化浊丸中三七的鉴别方案设计一、前言中药已经有了几千年的历史。几千年来，中医药做出的贡献巨大，起到了预防疾病和治疗的疾病的主要作用，与此同时也对人民的身心健康起到了重要的作用。然而利用薄层色谱法鉴别中成药是鉴别中的一种重要的形式。常用于鉴别中成药制剂中的有效成分，薄层鉴别三七这味药在于优化，以三七为鉴别对象，进行一系列的考察，展开系统、不同厂家材质的薄层板、温湿度等等对三七薄层色谱的影响，最终确定最佳的薄层色谱条件进行鉴别。之所以采用薄层鉴别是因为薄层色谱鉴别的能力较强，另外使用的仪器也非常简单，同时操作起来也是非常方便的，就现有的鉴别方法中很大程度上是超过了显微鉴别、理化鉴别和光谱鉴别的。二、检验目的TLC方法是实验室鉴别的方法之一，同时薄层色谱法是现代药物分析中，常用的一种检测技术，具有鉴别含量测定的作用。中成药生产过程中使用此类方法鉴别，在于方便快捷同时还可以查看是否符合生产标准，因为中成药的生产都必须按照中国药典的相关标准进行生产。中药材的色谱鉴别有利于生产厂家进行原材料选购生产控制。三、检验依据《中华人民共和国药典》2020版四部通则0502.四、检验仪器及试剂、药品（1）薄层板：硅胶G板批号：20201102生产厂家：青岛海洋化工有限公司GF254板批号：20201102生产厂家：青岛海洋化工有限公司H板批号：20210105生产厂家：青岛海洋化工有限公司高效板批号：20201102生产厂家：青岛海洋化工有限公司邦凯板批号：2103039G生产厂家：青岛邦凯高新技术材料有限公司（2）薄层点样，铺板系统点样器仪器编号：ZJ-YJ-057一般采用微升毛细血管点样，点样管常用的规格有1ul，2ul，3ul，5ul。展开容器：一般像上行的展开可以选用和薄层板大小的专用平底的或者是具有双槽的展开缸进行展开等一系列的操作，需注意的是展开时必须进行密闭饱和。（3）超声波清洗器，型号：SK5200H（4）数显恒温水浴锅，型号：HH-6S（防干烧）（5）显色装置：鼓风干燥箱，型号：BGZ-70无油空气压缩机，型号：550-25（45/7）（6）检视装置：薄层色谱成像系统，型号：GOODLCK-2000该机器装有可见日光，254nm，365nm紫外光光源及相应的滤光片的暗箱，另外附加摄像设备供拍摄图像用，暗箱中光源有足够的光照度。（7）试剂：正丁醇，批号：6942181000698；生产厂家：国药集团化学试剂有限公司；乙酸乙酯，批号：6942181001312；生产厂家：国药集团化学试剂有限公司；氨水，批号：6942181000292；生产厂家：国药集团化学试剂有限公司。（8）药品（通络化浊丸）由三七，丹参，决明子，人参，白芍等药组成。其主要功效在于消肿止痛。五、检验方法及内容1、对照品溶液的制备取人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Rg1对照品，加甲醇制成每1ml各含0.5mg的混合溶液，作为对照品溶液。2、通络化浊丸供试品溶液的制备取通络化浊丸的内容物20g，粉碎，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使得溶解，用水饱和的正丁醇振摇萃取2次，每次25ml，合并正丁醇液，用水洗涤2次，每次10ml，弃去水洗液，分取正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇4ml使溶解，即可得到供试品溶液。3、薄层色谱条件及展开用毛细管吸取对照品溶液与供试品溶液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上不同点处，然后配以相应的展开剂（正丁醇-乙酸乙酯-氨水4:1:5），展开，取出，晾干，喷以10%硫酸溶液，在日光和紫外下检视。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。4、重现性检查重新性考察：取人参皂苷Rb1、Rg1对照品、通络化浊丸供试品，由两位实验者按照上面叙述并确定的供试品溶液制备方法、薄层色谱条件，两位同时进行对三七薄层鉴别的重现性试验。观察下面所展示的图片，证明这类方法用于鉴别三七的重现性是非常合适的。耐用性考察：取上述两位实验者中的任何一个人的人参皂苷Rb1、Rg1对照品、通络化浊丸供试品，按照上述确定的薄层色谱条件试验，考察上述薄层色谱方法对3种不同的薄层板（高效板，邦凯板，G板）的耐用性，观察下面所展示的图片这类方法用于鉴别三七对于不同的薄层板的耐用性好。高效板邦凯板硅胶G板实验结论：经检验，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。六、方案验证及分析1、点样在点样的时候我们可以根据自己个人的需求量来选择毛细管，所有的毛细管都是可以重复使用的，在点样的时候需要重复的吸取甲醇，反复吸取十次左右，来确保毛细管无污染情况，然后再依次去吸取上述的两种溶液（对照品溶液与供试品溶液；每次吸取不同的溶液都需要进行润洗，以防造成样品污染）分别点于同一硅胶G薄层板上，一般情况下都是以圆点点样