产朊假丝酵母生产谷胱甘肽过程控制与优化.pdf

江南大学博士学位论文产朊假丝酵母生产谷胱甘肽过程控制与优化姓名：梁国斌申请学位级别：博士专业：发酵工程指导教师：堵国成20080901摘要细胞膜的完整性具有抗脂质氧化作用使细胞免受伤害从而维持细胞正常代与其他生产姆椒活性组织提取、化学合成和酶转化法啾冉希．3龇⒕辏允迪諫发酵高产发酵过程进行优化控制主要研究内容如下：疾炝朔峙嘌⒅甘俾柿骷雍秃闼倭骷佣韵赴ず虶合成的影响并提出了三阶段峙嘌⒅甘俾柿骷雍秃闼倭骷细胞高密度培养策略。分批培养时初糖咸烟浓度为闶骷补糖速度为的大量积累会对谷氨酰半胱氨酸合成酶卑腚装彼崽砑恿课添加量的ィ4耍疾炝巳苎醵园腚装彼嵛蘸虶合成的影响并提出了两阶段溶氧水平控制与半胱氨酸添加相结合的策略来促进铣桑峁腚装添加砑优ǘ任／相组合通过低胁迫和两阶段溶氧控制芯恳∑刻跫孪赴そ锥喂劝彼帷腚装彼岷透拾彼崛职被岫韵谷胱甘肽魑R恢志哂醒荆劝滨；哇匣纳锘钚匀模怯晒劝酸、半胱氨酸和甘氨酸缩合而成。汕宄诔跷镆蚶胱雍妥杂苫；谢。因而谑称贰⒁揭⒈＝⒖顾ダ戏矫娴挠τ萌找婀惴骸生物发酵法是目前ひ祷淖钇毡榉椒ㄖ弧１韭畚囊砸恢旮呋跥的产朊假丝酵母西量、高得率和高生产强度为目标采用增加细胞密度骷优嘌、提高胞内含量疤灏被崽砑印再生约盎肪承财鹊纫幌盗屑际跤氩呗裕訥⒔逼咸烟窍耐瓯希甘俾柿骷比生长速率为发酵培养螅赴芏却珿浓度为谙赴呙芏扰嘌∩希疾炝税腚装彼崽砑佣訥合成的影响一次性添加半胱氨酸为／保珿产量达最大值／挥捎诎贕活性产生反馈抑制作用因而进一步考察低胁迫与半胱氨酸添加相结合对铣傻挠跋欤／腚氨酸分两次看疞砑硬⒂氲蚿财冉岷洗俳鳪合成最终总产量达／保⑾钟糜贕合成的半胱氨酸仅为其酸的添加量由／跎俚疞；添加量降低了％而咳达到／榷哉仗岣吡ァＷ詈蠼玴财群腿苎蹩刂仆庇氚腚装彼产量达／榷哉仗岣吡ァ胞生长和铣傻挠跋欤胩砑庸劝彼岷桶腚装彼嵯啾龋砑痈拾彼岫韵赴疞／／细胞密度和看／直鸨榷哉仗岣吡％和．ァ赴Ｖ股ず螅尤肴职被幔⑼ü鼵．笛橛呕／腚装彼．／徊浇浇锥伟被崽砑硬呗杂胂赴诹浇锥伟被崽砑踊∩希疾炝朔⒔秃笃诎谇疤灏被崤ǘ取／合赴徊骄璖处理后砑恿课／胫苯犹砑覣相比成本显著下降说明该策略具有很好的实用性。制细胞生长为此提出在细胞生长期添加低浓度和细胞停止生长时添加高浓胞内看．％。将此策略应用于还原酶活性明显增强说明虶直接参与了清除胞内和其它活性氧訬财却俳鳪合成机理进行初步探讨结果表明胁迫可使胞内半胱氨酸含量、关键词：谷胱甘肽产朊假丝酵母发酵过程优化细胞高密度培养氨基酸长和铣删写俳饔茫碧砑／拾彼幔⒔偷降保疞和到三种氨基酸最佳浓度配比劝彼／⒏拾彼．／经过嘌珿总产量达疞。两阶段氨基酸添加使细胞干重和看锏／ù瞬呗杂τ糜奚希赴芍睾糠直鹞／密度培养相结合时最终靠筛叽／贕含量为ァ含量和钚员浠⑾諫停止合成的主要原因是由于蛔闼隆通过添加俳鳪继续合成当砑恿课疞时懿看疞时懿靠纱／鳤用量则可减少％；此外通过补加葡萄糖和硫酸铵再生进铣桑峁鸊总产量为财榷訥合成影响结果表明可促进铣傻庇只嵋度的多次砑加财炔呗裕∑糠峙⒔徒崾课奚希⒔毕赴芍睾虶产量分别为．疞和／徊浇ù瞬呗杂τ糜奚虾拖赴呙芏培养相结合发酵结束时扛叽／贕含量为ィ直鸨榷哉仗岣吡ズァＭ保琀财仁拱诠趸饷负虶离子。富钚浴还原酶活性显明提高进而促进铣伞添加偕肪承财／／摘要、Ⅱ鷆