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血栓与止血筛查试验应用与评定凝血机制止凝血过程影响血液凝固6个方面血管受损血管收缩止血血液粘稠止血内皮细胞PAFPLT黏附聚集止血TXA25-HT释放暴露内皮下胶原激活Ⅻ内源性凝血止血TF释出外源性凝血止血合成PAI抑制纤溶系统止血血管止血作用表现为:血管收缩:内皮素(ET)、血管担心素血小板激活:vWF、血小板活化因子(PAF)凝血系统激活:开启内外源凝血路径局部血粘度增高抗纤溶作用血管壁完整时,血管主要表现其抗血栓活性:血管松弛、舒张作用抑制血小板聚集作用抗凝作用血管内皮细胞合成一氧化氮(NO)、前列环素(PGI2):扩张血管、抑制血小板聚集功效。纤溶酶原激活物(PA):激活纤溶酶、去除小凝块。抗凝血酶(AT):灭活凝血酶,抑制凝血。血栓调整蛋白(TM):参加蛋白C系统抗凝作用肝素或类肝素物质:含有各种抗凝活性血管受损血小胶原暴露板止血小板粘附血功血小板聚集能血小板释放血小板栓子2.血小板机制3.凝血因子机制凝血因子特点:正常情况下,存在于血液中凝血因子均为无活性酶原,处于无活性状态。血液凝固是一系列凝血因子连锁性反应结果。当凝血过程被激活时,其中一个凝血因子按次序以另一个凝血因子为底物,使之激活成为含有活性酶,形成“瀑布样反应”。凝血过程一旦开始,一定会进行到底。凝血过程有自行扩大正反馈作用。纤维蛋白原纤维蛋白内源性凝血路径外源性凝血路径(接触胶原纤维等)(组织因子)Ca2+XIIaXIIVIIaVIIXIXIaIXIXaVIIIaCa2+VPF3XXa,Va,Ca2+,磷脂(凝血酶原酶)XaVaCa2+PF3凝血酶原(II)凝血酶(IIa)3.凝血因子机制凝血过程瀑布学说内源凝血路径(intrinsicpathway)是指由FXII被激活至FIXa-VIIIa-Ca2+-PF3复合物形成过程。外源凝血路径(extrinsicpathway)是指从TF释放到TF-VIIa-Ca2+复合物形成过程。共同凝血路径(commonpathway)是指从FX激活到纤维蛋白形成过程。它是内、外凝血系统共同凝血阶段。在共同凝血路径中有两步主要正反馈反应(有效地放大了内、外源凝血路径作用)1)FⅩa可反馈激活因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ。2)FⅡa可反馈激活因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅻ和Ⅱ。还可使血小板发生聚集和释放反应,刺激血小板收缩蛋白引发血块退缩。不过大量凝血酶产生却反过来破坏FⅧ和FⅤ,这是正常凝血负反馈调整,以预防不适当过分凝血。FVIIIa和FVa是FXa和凝血酶激活限速因子,(FVIIIa作为辅因子,使FIXa对FX激活速度提升20万倍;FVa作为辅因子可使FXa对凝血酶原激活速度提升10000倍)Ⅻa和Ⅶa也可分别自我激活Ⅻ和Ⅶ,加速内外凝血反应。整个凝血过程中,中心步骤是凝血酶形成。一旦产生凝血酶,即可加速凝血过程,但受损部位纤维蛋白质凝块形成又必须受到制约而不能无限扩大和长久存在,这一作用由抗凝系统和纤溶系统调整控制。丝氨酸蛋白酶抑制物蛋白质C系统组织因子路径抑制物(TFPI)肝素丝氨酸蛋白酶抑制物生理性抗凝物质抗凝作用纤溶:纤溶酶原被激活成为纤溶酶,作用于纤维蛋白(原),使之降解成各种肽链碎片。作用:分解多出不可溶纤维蛋白(原),去除血管内因为纤维蛋白沉积引发阻塞,保持血流通畅。组成:PLG(纤溶酶原)→PL(纤溶酶)t-PA:组织型纤溶酶原激活物u-PA:尿激酶型纤溶酶原激活物PAI-1(纤溶酶原激活抑制物-1)α2-AP(α2–抗纤溶酶)止血止凝血障碍性疾病发病机制血栓与止血惯用检测项目(一)BT和BPC检测BT是指皮肤被刺破后自然出血到自然止血所经历时间(min),反应毛细血管结构/功效以及血小板数量/功效异常试验。BPC是指单位容积(L)全血中所含血小板数量,反应循环血液中血小板数量(×109/L)。参考范围:BT(模板刀片法6.9±2.1mim);IVY法已少用,Duke法已弃用。BPC手工法和仪器法均界定为(100~300)×109/L。2.凝血因子抑制物:凝血因子抑制物和狼疮抑制物检测PT所用组织凝血活酶试剂敏感度:基因重组>人脑>胎盘>兔脑ISI是指标准品组织凝血活酶与每一批组织凝血活酶PT校正曲线斜率。即在双对数坐标纸上,纵坐标是用标准品测定PT对数值,横坐标是用待校正确组织凝血活酶测定相同标本PT对数值。尤其注意:Hct<30%或>50%时,抗凝剂与全血百分比应按公式抗凝剂(mL)=(100-HcT)×血液(mL)×0.00185调整;血标本量(mL)=枸橼酸钠量(mL)×9×(1.00-0.45)/(1.00-HcT)调整。以防造成PT假性延长。【临床应用】1.出血筛查:筛查低纤维蛋白原(假如<1.0g/L,有出血风险)筛查纤维蛋白原功效异常监测肝脏功效监测凝血过程消耗2.监测溶栓治疗:3.判别原发性纤溶和继