生物化学核酸专家讲座.pptx

（二）DNA双螺旋结构模型关键点（Watson,Crick,1953）碱基互补配对DNA第三节RNA结构与功效大多数天然RNA是一条单链，经过本身回折形成部分螺旋区，部分非螺旋区。RNA一级结构分子组成：A、U、C、G二级结构基本元件生物化学核酸专家讲座RNA种类、分布、功效mRNA：是携带从DNA编码链得到遗传信息，并以三联体密码子方式指导蛋白质生物合成RNA，由5’非翻译区、编码区和3’非翻译区组成。*mRNA结构特点帽子结构5´-cap：m7G(5´)pppNmp*mRNA结构特点mRNA核内向胞质转移mRNA稳定性维系翻译起始调控*mRNA功效把DNA所携带遗传信息，按碱基互补配对标准，抄录并传送至核糖体，指导蛋白质合成。*tRNA一级结构特点分子量较小，普通由73～93个核苷酸组成各种tRNA3′一端为CCA；5′一端大多数为pG，少数为pC含10~20%稀有碱基，如DHU，等N,N二甲基鸟嘌呤*tRNA二级结构——三叶草形氨基酸臂DHU环反密码环TΨC环额外环1980年牛心线粒体tRNAser只有63个核苷酸，沉降常数3S，缺乏D环和D臂，呈二叶草型。tRNAfunctionsasaaminoacidtransferinproteinbiosynthesis.*rRNA结构原核生物*rRNA种类（依据沉降系数）大肠杆菌16S，5SrRNA二级结构核糖体组成Thecrystalstructureofa23Sribosme四、其它小分子RNA及RNA组学snmRNAs种类核内小RNA核仁小RNA胞质小RNA催化性小RNA小片段干涉RNARNA组学研究细胞中snmRNAs种类、结构和功效。同一生物体内不一样种类细胞、同一细胞在不一样时间、不一样状态下snmRNAs表示含有时间和空间特异性。核酸和蛋白质比较核酸理化性质ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid一、核酸分子含有强烈紫外吸收效应1.DNA或RNA定量OD260=1.0相当于50μg/ml双链DNA40μg/ml单链DNA（或RNA）20μg/ml寡核苷酸2.判断核酸样品纯度DNA纯品:OD260/OD280=1.8RNA纯品:OD260/OD280=2.0二、核酸变性(denaturation)例：变性引发紫外吸收值改变热变性Tm：解链过程中，紫外光吸收值改变ΔA260到达最大改变值50%时温度称为DNA解链温度，又称融解温度(meltingtemperature,Tm)。Tm与G+C含量成正相关。三、DNA复性与分子杂交影响复性原因在DNA变性后复性过程中，假如将不一样种类DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度碱基配对关系，在复性时就能够形成杂化双链(heteroduplex)。这种杂化双链能够在不一样DNA与DNA之间形成，也能够在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。DNA-DNA杂交双链分子生物化学核酸专家讲座生物化学核酸专家讲座单链DNA与DNA杂交（DNA-DNA）—SouthernblotSouthernBlotting探针第五节核酸酶Nuclease核酸酶是指全部能够水解核酸酶依据底物不一样分类DNA酶(deoxyribonuclease,DNase)：专一降解DNA。RNA酶(ribonuclease,RNase)：专一降解RNA。依据切割部位不一样核酸外切酶：5´→3´或3´→5´核酸外切酶。核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。消化降解食物中核酸以利吸收负责去除多出、结构和功效异常核酸，同时也能够去除侵入细胞外源性核酸参加DNA合成与修复及RNA合成后剪接等主要基因复制和基因表示过程体外重组DNA技术中主要工具酶核酶核酶详细作用主要有：1.核苷酸转移作用2.水解反应，即磷酸二酯酶作用3.磷酸转移反应，类似磷酸转移酶作用4.脱磷酸作用，即酸性磷酸酶作用5.RNA内切反应，即RNA限制性内切酶作用核酶发觉意义小结DNA和RNA比较核酸理化性质小测验3.关于HbS引发镰刀状贫血症，以下说法正确是：A.由单氨基酸替换所致B.位于HbAβ链第六位Glu替换为ValC.HbS以脱氧形式发生聚合，造成毛细血堵塞D.蛋白质全部氨基酸替换均引发蛋白质功效改变E.这种替换改变蛋白关键区域亲水性性质4.关于tRNA结构描述错误是：A.含有较多修饰成份,含10~20%稀有碱基B.单链结构，二级结均含有三叶草结构特征C.3′一端为CCA；5′一端大多数为pG，少数为pCD.含有活化转运氨基酸作用，参加蛋白质翻译E.每个tRNA仅能转运一个氨基酸5.依据Watson-Crick模型，求得每一微米DNA双螺旋含核苷酸正确平