切割运载体和含有目的基因的DNA片段专家讲座.pptx

构想1把这么奇思妙想变为现实是20世纪70年代兴起高新科技——基因工程。基因工程概念基因工程概念抗虫棉基因工程培育抗虫棉简明过程：实现上述步骤需要哪些工具？主要是从原核生物中分离纯化出来一个酶。能将外来DNA切断，因为这种切割作用是在DNA分子内部进行，故名限制性核酸内切酶。4、特点：寻根问底T大肠杆菌一个限制酶EcoRI,能识别GAATTC序列，并在G和A之间切开。什么叫黏性末端？什么叫平末端？1、要想取得某个特定性状基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？基因针线──DNA连接酶二、DNA连接酶——“分子缝合针”阅读课文：DNA聚合酶只是将一个个脱氧核苷酸加到DNA单链上(DNA复制）；而DNA连接酶是将两个DNA片段缺口连接起来（基因工程）。…GAATTCCGTAGAATTCGGATT…一、基因工程概念.二、DNA重组技术基本工具1.限制性核酸内切酶---”分子手术刀”2.DNA连接酶---”分子缝合针”以下是两种限制酶切割后形成DNA片段，试分析：①GC…②AATTC…③…GC④…CTTAACG…G……CG…G(1)其中①和是由一个限制酶切割形成末端，二者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是。（2）和是由另一个限制酶切割形成末端，二者要形成重组DNA片段，所用连接酶通常是。三、基因进入受体细胞载体—分子运输车假如目标基因导入受体细胞后不能复制将怎样？作为载体没有切割位点将怎样？目标基因是否进入受体细胞，我们肉眼看不到，怎样判定？假如载体对受体细胞有害将怎样？我们敢选取从霍乱弧菌中质粒来做载体吗？作为载体必要条件:质粒特点：练习DNA重组技术基本工具：限制酶所识别序列有什么特点？限制酶所识别序列，不论是6个碱基还是4个碱基，都能够找到一条中心轴线，中轴线两侧双链DNA上碱基是反向对称重复排列。限制酶识别序列中心轴线