蛋白质免疫印迹实验WesternBlot专家讲座.pptx
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蛋白质免疫印迹试验(WesternBlotting)一试验原理一试验原理一试验原理
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试验二蛋白质免疫印迹技术一、免疫学免疫学研究范围很广,与很多相关学科交织在一起,而且发展成了很多学科,如免疫生物学、免疫遗传学、血液免疫学、肿瘤免疫学等。伴随免疫生物学发展,人们发觉在高等动物体内存在着含有免疫功效组织结构(即免疫系统)。免疫系统功效生理和病理表现当外源异体物质,如细菌、病毒、蛋白质、多糖等进入动物机体后,能够激活机体免疫系统,产生对外源物质排除作用,从而保护机体免受外源物质侵害。机体这一特异免疫应答功效细胞基础是淋巴细胞。抗原和免疫原性抗原分类抗体种类抗原抗体反应(antigen-ant
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(完整版)蛋白免疫印迹(westernblot)实验.doc
蛋白免疫印迹(westernblot)实验实验步骤:一、试剂准备1.SDS-PAGE试剂:见聚丙烯酰胺凝胶电泳实验。2.匀浆缓冲液:1.0MTris-HCl(pH6.8)1.0ml;10%SDS6.0ml;β-巯基乙醇0.2ml;ddH2O2.8ml。3.转膜缓冲液:甘氨酸2.9g;Tris5.8g;SDS0.37g;甲醇200ml;加ddH2O定容至1000ml。4.0.01MPBS(pH7.4):NaCl8.0g;KCl0.2g;Na2HPO41.44g;KH2PO40.24g;加ddH2O至1000
WesternBlot(免疫印迹法)实验方法步骤.doc
WesternBlot(免疫印迹法)实验方法步骤发布日期:2008-8-25热门指数:4360WesternBlot(免疫印迹法)主要包括以下4个基本步骤:n样品制备n电泳分离n蛋白的膜转移n免疫杂交与显色――蛋白检测溶液和试剂n1X磷酸盐缓冲液(PBS)nModifiedRIPAbufferTris-HCl:50mM,pH7.4;NP-40:1%;Na-deoxycholate:0.25%;NaCl:150mM;EDTA:1mM;PMSF:1mM;Aprotinin,leupeptin,pepstati