一种细胞染色试剂盒及其使用方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102866052A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102866052A(43)申请公布日2013.01.09(21)申请号201210392692.X(22)申请日2012.10.16(71)申请人百奥迈科生物技术有限公司地址226016江苏省南通市经济技术开发区常兴路76号(72)发明人朱远源陈莉李铁军吴美华(74)专利代理机构上海申汇专利代理有限公司31001代理人翁若莹(51)Int.Cl.G01N1/30(2006.01)权利要求书权利要求书1页1页说明书说明书77页页附图附图33页(54)发明名称一种细胞染色试剂盒及其使用方法(57)摘要本发明提供了一种细胞染色试剂盒及其使用方法。所述的细胞染色试剂盒，其特征在于，包含无花果叶提取液、碱性染料、酸性染料和细胞核染色试剂。本发明首次使用无花果叶提取物用于宫颈癌早期诊断，以增强细胞对染色试剂的亲和性，提高染色效率和细胞的辨别率，提高宫颈癌诊断的准确率。CN102865ACN102866052A权利要求书1/1页1.一种细胞染色试剂盒，其特征在于，包含无花果叶提取液、碱性染料、酸性染料和细胞核染色试剂。2.如权利要求1所述的细胞染色试剂盒，其特征在于，所述的碱性染料为新品红染色液。3.如权利要求1所述的细胞染色试剂盒，其特征在于，所述的酸性染料为亮绿染色液。4.如权利要求1所述的细胞染色试剂盒，其特征在于，所述的细胞核染色试剂为Harris苏木素染色剂。5.权利要求1-4中任一项所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，依次包括如下步骤：第一步：将细胞样本用固定剂固定后，用去离子水洗涤；第二步：用细胞核染色试剂对第一步所得的细胞样本的细胞核进行染色，用自来水冲洗后，再用去离子水洗涤；第三步：用无花果叶提取液孵育第二步所得的细胞样本，用去离子水洗涤；第四步：用碱性染料孵育第三步所得的细胞样本，用去离子水洗涤；第五步：用酸性染料孵育第四步所得的细胞样本，用去离子水洗涤；第六步：将第五步所得的细胞样本干燥后，封片观察。6.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第一步的具体步骤为：将细胞样本于质量浓度为10％的三氯乙酸溶液中固定60min，用去离子水洗涤10sec。7.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的细胞样本是细胞涂片或组织切片。8.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第二步的具体步骤为：用Harris苏木素对第一步所得的细胞样本的细胞核进行染色9min，用自来水冲洗1min后，用去离子水洗30sec，再浸入去离子水10sec。9.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第三步的具体步骤为：用无花果叶提取液孵育第二步所得的细胞样本3min，用去离子水洗1min，再浸入去离子水10sec。10.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第四步的具体步骤为：用新品红染色液孵育第三步所得的细胞样本1min，用去离子水洗1min，再浸入去离子水10sec。11.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第五步的具体步骤为：用亮绿染色液孵育第四步所得的细胞样本1min，用去离子水洗30sec，再浸入去离子水10sec。12.如权利要求5所述的细胞染色试剂盒的使用方法，其特征在于，所述的第六步的具体步骤为：将第五步所得的细胞样本晾干，用中性树胶封片。2CN102866052A说明书1/7页一种细胞染色试剂盒及其使用方法技术领域[0001]本发明涉及一种细胞染色试剂盒及其使用方法，尤其是指一种用于宫颈癌早期诊断和鉴别的细胞染色试剂盒及其使用方法。背景技术[0002]宫颈癌是影响妇女健康的常见恶性肿瘤之一，其发病率仅次于乳腺癌而居女性肿瘤的第二位。全世界每年约有50万新发宫颈癌病例，亚洲约38万，中国约15万例，全世界每年约23万妇女死于宫颈癌，亚洲约19万，中国约8万。这个数据显示宫颈癌已成为中国妇女健康的巨大威胁(NgE等，CMAL，2004，170(10)：1545-1549；乔友林，2006，26(12)：1293-1295)。宫颈癌中95％是鳞状细胞癌(SqumousCellsCarcinoma，SCC)，临床一期的治愈率可达到80～90％，二期时是60～70％，进入三期是40～50％，但发展到四期只有10％的治愈率。因此对宫颈癌前病变包括宫颈上皮内瘤变(CervicalIntraepitheliumNeoplasia，CIN)的防治和早期诊断宫颈癌是控制其发生、发展和预后的关键(HuthWK，JNatlComprCancNetw，2010，8：1329-1330)，进一步探索针对宫颈癌早期