检测ACE基因多态性的引物、探针及应用、试剂盒和检测方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN108690876A(43)申请公布日2018.10.23(21)申请号201810301466.3(22)申请日2016.08.25(62)分案原申请数据201610732578.52016.08.25(71)申请人杭州百迈生物股份有限公司地址311228浙江省杭州市大江东产业聚集区临江高新区纬五路3688号科创园2幢四层(72)发明人林源吉丁佳女(51)Int.Cl.C12Q1/6883(2018.01)C12Q1/6858(2018.01)C12N15/11(2006.01)权利要求书1页说明书13页序列表5页附图3页(54)发明名称检测ACE基因多态性的引物、探针及应用、试剂盒和检测方法(57)摘要本发明涉及指导高血压用药指导的基因检测。包括检测ACE(rs4646994)多态性的引物、探针及其应用。所述引物和探针能在荧光定量PCR平台上有效地检测出插入/缺失突变型的ACE(rs4646994)基因，操作方法简单易行，即降低污染风险，又提高效率，为高血压的临床用药提供了一个简捷判断的新途径，具有极高的临床应用价值。CN108690876ACN108690876A权利要求书1/1页1.检测ACE基因多态性的寡核苷酸，包括检测ACE基因的rs4646994位点的引物，所述引物序列为：ACE(rs4646994)上游引物：TTTCTCCCATTTCTCTAGACCT(SEQNO11)ACE(rs4646994)下游引物1：ATCCCGCCACTGCACT(SEQNO12)ACE(rs4646994)下游引物2：TCAGAGAATTTCAGAGCTG(SEQNO13)。2.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其特在在于，还包括针对基因多态性位点设计的野生型和突变型的两条探针。3.根据权利要求2所述的寡核苷酸，其特征在于，检测ACE(rs4646994)多态性的探针序列为：探针11：CGCTCTGTCGCCCAGGC(SEQNO26)探针12：CTATACAGTCACTTTTATGTGGTTT(SEQNO27)。4.根据权利要求1至5之一所述的寡核苷酸在指导高血压用药的检测试剂盒中的应用。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的高血压用药为血管紧张素抑制剂转化酶。6.指导高血压用药的检测试剂盒，包括检测ACE基因多态性的寡核苷酸，所述寡核苷酸包括检测ACE基因的rs4646994位点的引物，所述引物序列为：ACE(rs4646994)上游引物：TTTCTCCCATTTCTCTAGACCT(SEQNO11)ACE(rs4646994)下游引物1：ATCCCGCCACTGCACT(SEQNO12)ACE(rs4646994)下游引物2：TCAGAGAATTTCAGAGCTG(SEQNO13)。7.根据权利要求6所述的检测试剂盒，其特征在于，还包括针对基因多态性位点设计的野生型和突变型的两条探针。8.根据权利要求7所述的寡核苷酸，其特征在于，两条探针序列为：探针11：CGCTCTGTCGCCCAGGC(SEQNO26)探针12：CTATACAGTCACTTTTATGTGGTTT(SEQNO27)。9.指导高血压用药的检测方法，包括以下步骤：(a)提取样品中的基因组DNA；(b)扩增并检测ACE基因rs4646994位点的多态性；其中扩增ACE基因的rs4646994位点的引物序列为：ACE(rs4646994)上游引物：TTTCTCCCATTTCTCTAGACCT(SEQNO11)ACE(rs4646994)下游引物1：ATCCCGCCACTGCACT(SEQNO12)ACE(rs4646994)下游引物2：TCAGAGAATTTCAGAGCTG(SEQNO13)。10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，还包括针对基因多态性位点设计的野生型和突变型的两条探针，所述两条探针序列为：探针11：CGCTCTGTCGCCCAGGC(SEQNO26)探针12：CTATACAGTCACTTTTATGTGGTTT(SEQNO27)。2CN108690876A说明书1/13页检测ACE基因多态性的引物、探针及应用、试剂盒和检测方法技术领域[0001]本发明涉及分子生物学和医学领域，具体涉及指导高血压用药相关性SNP位点的检测组合物、试剂盒和检测方法。背景技术[0002]目前临床常用的抗高血压药物有5大类：利尿剂、血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素受体阻滞剂、β受体阻滞剂、钙离子拮抗剂。药物在体内代谢过程中涉及到多种药物代谢酶、转运体和受体，它们存在的基因多态性最终导致了患者以相同方式服用同种药物时，其治疗效果、产生的不良发展及其对药物的耐受性等方面存在明显的个体差