一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒及其方法、应用.pdf

(19)国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号CN116106539A(43)申请公布日2023.05.12(21)申请号202310385294.3(22)申请日2023.04.12(71)申请人北京芯迈微生物技术有限公司地址101200北京市平谷区中关村科技园区平谷园兴谷A区7号-21032（集群注册）(72)发明人杨小慧李会强李雪杨赣英叶涛(74)专利代理机构北京智宇正信知识产权代理事务所(普通合伙)11876专利代理师李明卓(51)Int.Cl.G01N33/533(2006.01)G01N33/543(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图2页(54)发明名称一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒及其方法、应用(57)摘要本发明属于体外诊断与免疫检测技术领域，提出一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒，包括载体，所述载体上沿样本流动方向依次设置有标记区、检测区，所述检测区设置有放置荧光微球的微孔，所述微孔的数量为多个，所述微孔沿样本流动方向呈微阵列分布，所述荧光微球上包被有抗原，所述荧光微球的数量为多个，多个荧光微球为同一种荧光色素，且每个荧光微球的荧光色素含量不同，不同荧光色素含量的荧光微球分别包被不同的抗原，经激光照射后，荧光微球能发出同一荧光色泽但荧光强度不同的荧光，依次能够区分不同标号的荧光微球，进而区分不同的包被抗原，比起传统的多重包被方式使用的分散包被，包被过程更加集中且操作更简单。CN116106539ACN116106539A权利要求书1/1页1.一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒，包括载体，其特征在于，所述载体上沿样本流动方向依次设置有标记区、检测区，所述检测区设置有放置荧光微球的微孔，所述微孔的数量为多个，所述微孔沿样本流动方向呈微阵列分布，所述荧光微球上包被有抗原，所述荧光微球的数量为多个，多个荧光微球为同一种荧光色素，且每个荧光微球的荧光色素含量不同，不同荧光色素含量的荧光微球分别包被不同的抗原。2.根据权利要求1所述的一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒，其特征在于，所述载体为微流控芯片，所述微流控芯片包括微流控基片及压合于微流控基片上的微流控盖片，基片和盖片围合形成微通道，所述微通道一端与盖片上开设的加样孔连通，另一端与废液收集池连通，微流控基片的微通道内沿样本的流动方向依次设有标记区、检测区。3.根据权利要求2所述的一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒，其特征在于，所述基片上设置有薄片，所述薄片的厚度为荧光抗原微球粒径的1/5，所述微孔为所述薄片上设置的通孔，所述通孔的数量为多个，多个通孔之间按微阵列分布。4.根据权利要求2所述的一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒，其特征在于，所述微孔为基片表面设置的凹槽，所述凹槽深度为荧光抗原微球粒径的1/5，所述凹槽上沿直径为荧光微球粒径的1/3~4/5之间。5.一种免疫微流控的多重抗原包被方法，其特征在于，应用如权利要求1‑4任一项的试剂盒，包括至少以下步骤：1）采用一定粒径的荧光微球作为包被载体，荧光微球提前以化学偶联方式包被特定抗原，经分离/封闭，质检，制备合格的荧光抗原微球；2）制作多个带有同一种荧光色素包被不同抗原的荧光抗原微球，且每个包被不同抗原的荧光微球的荧光色素含量不同；3）经激光照射后，荧光抗原微球能发出同一荧光色泽但荧光强度不同的荧光，依次区分不同的荧光抗原微球并进行标号，进而区分不同的包被抗原；4）将预先包被的荧光抗原微球取出，每种荧光抗原微球为1个球体，通过试剂盒的载体上预留的微孔，将每个荧光抗原微球随机放入芯片阵点，并将荧光抗原微球固定在载体上。6.一种根据权利要求5的方法在抗体检测试剂盒中的应用，其特征在于，包括如下步骤：在载体上先后加入待测样品和荧光报告分子标记的二抗与检测区的荧光抗原微球反应，样品中的待测抗体能够与荧光抗原微球和荧光报告分子标记的二抗特异性结合，使包被抗原的荧光微球携带上荧光报告分子，随后对荧光抗原微球进行检测和结果分析，其中一种激光能够将微球分类，进而区分包被抗原种类，另一种激光能够确定微球上结合的报告荧光分子的数量，从而确定微球上结合的目的分子的数量。2CN116106539A说明书1/5页一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒及其方法、应用技术领域[0001]本发明属于体外诊断和免疫检测技术领域，特别涉及一种免疫微流控的多重抗原包被试剂盒及其方法、应用。背景技术[0002]免疫微流控是将特异的抗原抗体反应与微流控芯片技术相结合的一种新兴开放式检测技术平台，近年来在临床检验工作中被广泛应用，荧光免疫微流控融合免疫微流控技术和荧光免疫分析的原理，是在传统微流控技术基础上的拓展，该技术特点是用荧光微球标记抗体作为检测探针，整个检测过程被整合至如“信用卡”大小的检测卡中，检测卡中含干燥标记抗体、微米级