一种纳米纤维化丝素蛋白基多孔支架的制备方法.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN102008756A*(12)发明专利申请(10)申请公布号CN102008756A(43)申请公布日2011.04.13(21)申请号201010583195.9A61L27/22(2006.01)(22)申请日2010.12.10(71)申请人苏州大学地址215123江苏省苏州市苏州工业园区仁爱路199号申请人丝科普乐（北京）生物科技有限公司(72)发明人吕强罗峥(74)专利代理机构苏州创元专利商标事务所有限公司32103代理人陶海锋(51)Int.Cl.A61L27/56(2006.01)A61L27/24(2006.01)权利要求书1页说明书5页附图1页(54)发明名称一种纳米纤维化丝素蛋白基多孔支架的制备方法(57)摘要本发明涉及一种多孔支架材料的制备方法，公开了一种纳米纤维化丝素蛋白基多孔支架的制备方法：将丝素溶液和胶原蛋白溶液在0～20℃下共混静置，促使胶原蛋白同丝素蛋白充分作用，以形成纳米纤维；然后将混合溶液进行冷冻，获得冷冻体；将冷冻体进行冷冻干燥处理，得到纳米纤维化多孔支架材料；将此多孔支架材料放入底部加有水、甲醇、或者乙醇水溶液的真空干燥器，抽真空后静置；获得不溶于水的纳米纤维化多孔支架；获得的多孔支架具有10～1000微米的相互贯通的孔隙，孔壁则是由直径在10～100纳米的纳米纤维组成，同细胞外基质具有相似的纳米和微米级结构，适合细胞的粘附和生长，具有良好的生物相容性。CN1028756ACN102008756A权利要求书1/1页1.一种纳米纤维化丝素蛋白基多孔支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1）按常规方法先将蚕丝经脱胶、溶解、透析得到丝素蛋白溶液，所述丝素蛋白溶液的质量浓度为0.1～20%；将胶原溶解到质量浓度为0.01～0.1%的乙酸溶液中，得到胶原蛋白溶液，所述胶原蛋白溶液的质量浓度为0.01%～2%；2）将丝素蛋白溶液同胶原蛋白溶液共混，混合后，丝素蛋白和胶原蛋白的质量比为100∶2～20；在0～20℃的条件下静置10分钟～24小时，得到丝素蛋白和胶原蛋白的混合溶液；3）将丝素蛋白和胶原蛋白的混合溶液注入模具中，在-10～-80℃的低温条件下经过1～24小时的冷冻过程，进行冷冻处理获得冷冻体；对冷冻结晶体进行冷冻干燥处理，得到可溶的丝素蛋白/胶原蛋白纳米纤维化多孔支架；4）将可溶的丝素蛋白/胶原蛋白纳米纤维化多孔支架放置在真空干燥器中，进行真空处理20分钟～24小时，获得不溶于水的纳米纤维化丝素蛋白多孔支架；所述真空干燥器底部含有水、甲醇水溶液或乙醇水溶液。2.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤1）中，将丝素蛋白溶液在0～80℃条件下放置1～48小时。3.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，步骤4）中，甲醇水溶液的体积浓度为1～100%；乙醇水溶液体积浓度为1～100%。4.根据权利要求1所述制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：1）按常规方法先将蚕丝经脱胶、溶解、透析得到纯的丝素蛋白水溶液，所述丝素蛋白水溶液的质量浓度为0.5%～5%，并在0～10℃下静置30分钟以上；将胶原溶解到质量浓度为0.01～0.1%的乙酸溶液中，所述胶原蛋白水溶液的质量浓度为0.05%～0.5%，并在0～10℃下静置30分钟至2小时；2）在0～10℃下，混合均匀丝素蛋白水溶液和胶原蛋白水溶液，混合后，丝素蛋白的质量浓度为0.2%～3%，胶原蛋白的质量浓度为0.02%～0.2%，静置4～10小时，得到丝素蛋白和胶原蛋白的混合溶液；3）将丝素蛋白和胶原的混合溶液注入模具中，在-10～-30℃的低温条件下经过20～24小时的冷冻过程，进行冷冻处理获得冷冻体；将冷冻体进行冷冻干燥处理，获得可溶的丝素蛋白/胶原蛋白纳米纤维化多孔支架；4）将可溶的丝素蛋白/胶原蛋白纳米纤维化多孔支架放置在真空干燥器中，进行真空处理4小时以上，获得不溶于水的纳米纤维化丝素蛋白多孔支架；所述真空干燥器底部含有水、甲醇水溶液或乙醇水溶液。5.根据权利要求4所述制备方法，其特征在于，步骤1）中，所述丝素蛋白水溶液的质量浓度为1%～2%；所述胶原蛋白水溶液的质量浓度为0.075%～0.2%；步骤2）中，混合均匀丝素蛋白水溶液和胶原蛋白水溶液时，取等体积的丝素蛋白水溶液和胶原蛋白水溶液。6.采用权利要求1、2、3、4或5中的一种的制备方法制备得到的丝素蛋白/胶原蛋白纳米纤维化多孔支架，其特征在于，所述纳米纤维化多孔支架由纳米纤维构成，所述纳米纤维直径在10～100纳米之间；所述纳米纤维化多孔支架具有孔径为10～1000微米的相互贯通的孔隙，孔隙率在80%以上。2CN102008756A说明书1/5页一种纳米纤维化丝素蛋白基多孔支架的制备方法技术领域[0001]本发明涉及一种多孔支架材料的制