一种细胞保存液、其制备方法和应用.pdf

(19)中华人民共和国国家知识产权局*CN103404509A*(12)发明专利申请(10)申请公布号(10)申请公布号CNCN103404509103404509A(43)申请公布日2013.11.27(21)申请号201310341570.2(22)申请日2013.08.07(71)申请人彭乐地址215125江苏省苏州市车坊镇淞泽家园四区44栋702室(72)发明人彭乐(74)专利代理机构北京品源专利代理有限公司11332代理人巩克栋(51)Int.Cl.A01N1/02(2006.01)权权利要求书1页利要求书1页说明书7页说明书7页附图4页附图4页(54)发明名称一种细胞保存液、其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种细胞保存液、其制备方法和应用，所述细胞保存液以100毫升氯化钠注射液和/或复方氯化钠注射液计，其中含有维生素0.01～1克、白蛋白0.1～10克、糖类0.1～1克、三磷酸腺苷和/或三磷酸腺苷二钠0.001～0.1克。本发明的细胞保存液在2-10℃的温度范围内保存细胞，在24小时内很好地维持了细胞活率和生物学特性，避免了细胞复苏和再次洗涤的风险，也避免了现有保存方法引起的细胞死亡和生物学特性改变，极大地扩大了中心实验室细胞应用的地域覆盖范围。CN103404509ACN103459ACN103404509A权利要求书1/1页1.一种细胞保存液，其特征在于，以100毫升氯化钠注射液和/或复方氯化钠注射液计，其中含有维生素0.01～1克、白蛋白0.1～10克、糖类0.1～1克、三磷酸腺苷和/或三磷酸腺苷二钠0.001～0.1克。2.根据权利要求1所述的细胞保存液，其特征在于，所述白蛋白选自人白蛋白及哺乳动物白蛋白中的一种或多种，优选人及哺乳动物的血白蛋白、卵白蛋白和乳白蛋白中的一种或多种，更优选人、牛、马及羊的血白蛋白、卵白蛋白和乳白蛋白中的一种或多种，最优选人血白蛋白。3.根据权利要求1或2所述的细胞保存液，其特征在于，所述维生素选自维生素A、维生素B1、维生素B2、维生素B4、维生素B6、维生素B9、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、维生素K、维生素H、维生素P、维生素PP、维生素M、维生素T和维生素U中的一种或多种，优选维生素C。4.根据权利要求1至3任一项所述的细胞保存液，其特征在于，所述糖类选自单糖、二糖、三糖和多糖中的一种或多种，优选葡萄糖、半乳糖、果糖、核糖和海藻糖中的一种或多种，更优选葡萄糖。5.根据权利要求1至4任一项所述的细胞保存液，其特征在于，以100毫升氯化钠注射液和/或复方氯化钠注射液计，其中含有维生素0.05～0.8克、优选0.1～0.6克、更优选0.2～0.5克、最优选0.3～0.4克，白蛋白0.5～8克、优选1～6克、更优选2～5克、最优选3～4克，糖类0.2～0.9克、优选0.3～0.8克、更优选0.4～0.7克、最优选0.5～0.6克，三磷酸腺苷和/或三磷酸腺苷二钠0.005～0.08克、优选0.01～0.06克、更优选0.02～0.05克、最优选0.03～0.04克。6.如权利要求1至5任一项所述的细胞保存液的制备方法，其特征在于，按相应含量将注射级别的所述维生素、白蛋白、糖类及三磷酸腺苷和/或三磷酸腺苷二钠加入所述氯化钠注射液和/或复方氯化钠注射液中，彻底溶解，充分混匀。7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述维生素、白蛋白、糖类及三磷酸腺苷和/或三磷酸腺苷二钠以注射液和/或冻干粉的形式加入所述氯化钠注射液和/或复方氯化钠注射液中。8.一种保存细胞的方法，其特征在于，将细胞加入如权利要求1至5任一项所述的细胞保存液中，置于2～10℃、优选3～8℃、更优选3～6℃、最优选4℃条件下保存。9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述保存的时间为0～48小时、优选6～42小时、更优选12～36小时、特别优选18～30小时、最优选24小时。10.如权利要求1至5任一项所述的细胞保存液在保存细胞中的应用；优选地，所述细胞为干细胞或免疫细胞，优选胚胎干细胞、成体干细胞、淋巴细胞、树突状细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞或肥大细胞，更优选脂肪干细胞、细胞因子诱导的杀伤细胞、树突状细胞、DC+CIK细胞、自然杀伤细胞或DC-T细胞，最优选脂肪干细胞或自然杀伤细胞。2CN103404509A说明书1/7页一种细胞保存液、其制备方法和应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种细胞保存液、其制备方法和应用。背景技术[0002]干细胞（StemCell，SC）是存在于生命个体中的一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的细胞群体。它们不仅存在于胚胎发育时期而且在成体内也广泛分布于各种组织器官的特定部位，故宏观上将其分为胚胎干细胞和成体干细胞。随着细胞替代治疗的