抗心磷脂抗体(ACA)IgGELISA.pdf

抗心磷脂抗体(ACA)IgGELISA用途磷酯有着广泛的生理意义。循环抗磷脂抗体的存在可引起种种疾病这些抗磷脂抗体的作用途径至今不清楚。可能通过与内皮细胞膜上磷脂的交叉反应防止花生四烯酸释放致使前列环素合成减少从而促进血小板凝聚；另一种机理是防止血纤维蛋白溶解酶原激活剂的释放降低血纤维蛋白溶酶原转变成血纤维蛋白溶酶致使血纤维蛋白裂解减低。ACA的存在常易发生静脉及动脉血栓形成。ACA对血小板膜上的磷脂具有交叉反应导致网状内皮系统摄血小板作用加强。ACA阳性见于急性缺血性脑病缺血性视神经病、脑血栓形成、偏头痛样头痛、肺源性高血压和习惯性流产。抗磷脂抗体综合症的实验室诊断主要是抗磷脂抗体测定。本试剂盒用于定性检测人血清中的抗心磷脂抗体ACAIgG浓度。试剂盒组成(储存于2-8°C)酶标板96wells浓缩洗涤液(20X)25ml吸收液12ml酶联物12ml底物A6ml阴性对照1vial底物B6ml终止液6ml标本收集1.避免溶血、高血脂标本。2.标本中若有悬浮物应离心去除。3.标本若不及时检测请冻存于-20°C。准备工作1.取出所需板条其余立即密封放回2-8°C。取出的板条应放入自封袋内（密封）平衡至室温再试验以防水滴凝聚在冷板条上。2.浓缩洗涤液(20X)用双蒸水稀释成1X(至500ml)。未用完的放回2-8°C。3.试剂盒应平衡至室温再试验。试验过程1.样品孔内先加入100ul吸收液再加入10ul血清标本。2.加入100ul阴性对照至相应孔内。(必要时加入100ul阳性血清至适当孔内)3.空白孔内加入100ul吸收液。4.轻轻混匀30秒钟封住板孔37°C45分钟。5.洗板：甩尽孔内液体每孔加入洗涤液350ul静止30秒后甩尽液体在厚叠吸水纸上拍干洗5次。6.每孔加入100ul酶联物轻轻混匀30秒钟封住板孔37°C30分钟。7.洗板：甩尽孔内液体每孔加入洗涤液350ul静止30秒后甩尽液体在厚叠吸水纸上拍干洗5次。8.每孔加入底物A、B各50ul；37°C避光10±3分钟。9.每孔加入终止液50ul混匀即刻在450nm处读取OD值。结果判断1.样品的OD值应减去空白孔的OD值。(对照的OD不用减去空白孔的OD值)2.吸收液内含干扰物质消除剂。3.阴性对照的OD值应小于0.20。4.Correction值标于阴性对照上Cutoff=Correction+阴性对照OD值5.Index值=样品OD值/Cutoff值6.Index≥1为阳性；Index在0.91-0.99间为可疑；Index≤0.90为阴性。注：z阳性血清已经处理不具有传染性但运输途中可能发生失活等现象。z阳性血清已经冻融不宜再冷冻收到后请立刻冷藏。z阳性血清已经稀释并添加防腐剂能够保存一段时间但冷藏期间逐渐失活属正常情况。