滋补肝肾中药对局灶性脑缺血大鼠脑内基质金属蛋白酶表达的影响.pdf

http://www.paper.edu.cn滋补肝肾中药对局灶性脑缺血大鼠脑内基质金属蛋白酶表达的影响1付强郭春莉王新陆山东中医药大学临床学院山东济南(250014)E-mail：[e-mail]摘要：目的：脑梗死后星形胶质细胞的过度活化将形成胶质瘢痕阻碍轴突生长基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinasesMMPs）是分解细胞外基质的蛋白酶类中最重要的一类。本实验拟研究滋补肝肾中药复健片对局灶性脑缺血大鼠脑内MMP－2、MMP－9表达的影响探讨复健片治疗缺血性卒中的作用机理。方法：雄性Wistar大鼠49只随机分为假手术组、模型组（分设1w、2w、3w组）、给药组（分设1w、2w、3w组）模型组与给药组进行右侧近端大脑中动脉电凝术造成大鼠局灶性脑缺血模型假手术组行同样开颅术但不凝闭大脑中动脉其余操作同模型组。于造模成功后第6天起药物组灌胃给予复健片剂量为9g生药/kg/d余二组分别灌胃给予同等量生理盐水日1次。分别在相应时间点取材后用酶联免疫吸附法检测MCAO大鼠脑内MMP－2、MMP－9的表达。结果：假手术组MMP－2、MMP－9（µg•ml-1）为334.17±6.68536.17±8.31；模型组给药1w后为582.00±6.21800.40±7.02；给药2w后为573.80±6.30793.80±6.54；给药3w后为565.00±9.10787.33±6.77；药物组给药1w后为590.80±9.60806.40±5.77；给药2w后为602.20±3.83819.40±7.50；给药3w后为613.20±7.23834.40±8.99。显示模型组MMP-2、MMP-9活性在给药1周后较假手术组有显著差异说明造模成功；模型组在给药1周、2周和3周后无差异；药物组在治疗2周和3周后同组间较前期有差异说明MMP-2、MMP-9活性随着用药时间的延长逐渐表达增强；药物组在治疗1周后MMP-2、MMP-9活性较同期模型组尚无显著差异但2周及3周后表达显著增强与同期的模型组产生了显著差异。结论：复健片治疗缺血性卒中的作用机理可能与后期上调MMP－2、MMP－9的表达从而抑制胶质瘢痕的形成以解除神经功能重塑的负面因素有关。关键词：复健片；缺血性卒中；MMP－2及MMP－91.引言中枢神经系统内的胶质细胞和神经元共同形成一个统一的有机体胶质细胞参与神经元功能的调节并在联系和维持神经元生存的微环境中起重要作用。而星形胶质细胞(AstrogliaAs)是中枢神经系统最主要的大胶质细胞。脑缺血缺氧后星形胶质细胞的反应性活化对神经元具有“双刃”作用[1]。瘢痕阻碍轴突生长的成分主要是胶原而明胶酶是唯一能降解Ⅳ型胶原三螺旋部位的酶类。Ⅳ型胶原酶主要包括明胶酶A(MMP-2)和明胶酶B(MMP-9)通常情况下只以酶原的形式存在机体主要通过对其基因表达、酶原激活、活性抑制等步骤的调控来控制其降解作用。因此研究药物对MMP－2及MMP－9的调控作用可以减少损伤诱导的基膜沉积从而有利于神经纤维延长穿过损伤区沿着原先的路径重新支配靶目标重新髓鞘化恢复正常传导使星形胶质细胞的功能扬长避短对防治神经系统疾病具有重要的意义。2.材料和方法2.1实验设计：随机对照的动物实验研究。2.2单位：实验在山东大学医学院药理实验室、山东中医药大学附属医院完成。