【精选】硫氰酸汞比色法测定血清氯.ppt

实验九硫氰酸汞比色法测定血清氯亚铁嗪比色法测定血清铁和总铁结合力【目的要求】1、掌握硫氰酸汞比色法测定血清氯化物的原理。2、掌握亚铁嗪比色法测定血清铁和总铁结合力原理。【实验原理】血清氯化物的氯离子与未解离的硫氰酸汞溶液混合时氯离子首先与汞结合形成难以解离的氯化汞并释放相应的硫氰酸离子此离子与试剂中的铁离子结合生成红色的硫氰酸铁其色泽与氯的含量呈正比。【实验操作】取试管4支加入物试剂空白管标准管测定空白管测定管血清0.10.1氯标准液0.1空白试剂3.0显色应用液3.03.03.0混匀置室温10min以试剂空白管调零在460nm波长处比色分别读取各管的吸光度。【计算】氯化物（mmol/L）=（A测-A测定空白）/A标*100【参考范围】血清氯化物96-108mmol/L脑脊液氯化物120-132mmol/L尿液氯化物170-250mmol/L【注意事项】1、此法对其他卤族元素也防身同样的呈色反应。但在正常人血液中上述元素含量低可忽略不计。2、显色液的呈色强度与硫氰酸汞和硝酸汞的含量有关。如呈色过强线性范围在125mmol/L以下增加硝酸汞的用量；呈色太弱增加硫氰酸汞的用量使用前二者进行调整使其色泽在460nm波长10cm光径比色杯测定吸光度在0.4左右为宜。3、本法校正曲线不经过原点但汞离子调控适当在70-140mmol/L范围线性良好。4、本法呈色温度应不低于20度室温过低易产生浑浊影响比色。5、可用于自动生化分析仪。6、每批标本测定应同时测定正常和异常值得质控血清所得值应该在允许误差范围内否则应查找原因。【评价】线性范围75-125mmol/L显色稳定性2h内呈色稳定干扰试验胆红素达到225.7umol/L结果增加2.9%Hb达到5g/L结果增加3.3%β-脂蛋白达到15.94g/L和17.0g/L时结果分别增加4.3%和7.8%。亚铁嗪比色法测定血清铁和总铁结合力【实验操作】1、血清铁测定取试管3支加入物空白管标准管测定管血清0.2铁标准液0.2去离子水0.2甘氨酸-盐酸缓冲液1.01.01.0混匀37度5min于562nm波长处以空白管调零读取A测（血清空白）亚铁嗪显色液(B)0.20.20.2混匀37度5min再次读取各管吸光度。2、血清总铁结合力测定在试管中加入血清0.45ml179umol/LTIBC铁标准液0.25ml及去离子水0.2ml充分混匀放置室温10min加入碳酸镁粉末20mg在10min内振摇数次3000r/min离心10min取上清液操作。取试管3支加入物空白管标准管测定管血清0.45铁标准液0.45去离子水0.45甘氨酸-盐酸缓冲液1.21.21.2混匀于562nm波长处以空白管调零读取A测（血清空白）亚铁嗪显色液0.050.050.05混匀放置室温15min再次读取各管吸光度。【计算】血清铁（umol/L）=（A测-A测空白*0.86）/A标*17.9TIBC（umol/L）=（A测-A测空白*0.97）/A标*71.6【参考范围】血清铁成年男性：11-30umol/L成年女性：9-27umol/LTIBC成年男性：50-77umol/L成年女性：54-77umol/L【注意事项】1、实验用水必须经过去离子处理。2、溶血标本对测定有影响3、标准液呈色可稳定24h学清呈色30