食品分析实验--硫氰酸钾比色法测定食品中铁.doc

实验十一硫氰酸钾比色法测定食品中铁一、实验内容使用可见分光光度计测定样品中铁的含量。二、实验目的与要求1、学习掌握分光光度计测定的原理及操作技术。2、掌握绘制工作曲线法进行定量测定。三、实验原理硫氰酸钾比色法：在酸性条件下三价铁离子与硫氰酸钾作用生成血红色的硫氰酸铁络合物溶液颜色深浅与铁离子浓度成正比故可以比色测定。反应式如下：Fe2(SO4)3+6KCNS2Fe(CNS)3+3K2SO4四、试剂（1）2%KMnO4溶液（2）20%KCNS溶液（3）2%K2S2O7溶液（4）浓H2SO4（5）铁标准使用液：准确称取0.4979g硫酸亚铁（FeSO4·7H2O）溶于100mL水中加入5mL浓硫酸微热溶解即滴加2%高锰酸钾溶液至最后一滴红色不褪色为止用水定容至1000mL摇匀得标准贮备液此液每毫升含Fe3+100µg。取铁标准贮备液10mL于100mL容量瓶中加水至刻度混匀得标准使用液此液每mL含Fe3+10µg。五、仪器可见分光光度计六、实验步骤1、样品处理：称取均匀样品12.5g干法灰化后加入2mL(1:1)盐酸在水浴上蒸干再加入5mL蒸馏水加热煮沸后移入100mL容量瓶中以水定容混匀。2、标准曲线绘制：准确吸取上述铁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL分别置于25mL容量瓶或比色管中各加5mL水0.5ml浓硫酸0.2mL2%过硫酸钾2mL20%硫氰酸钾混匀后稀释至刻度用1cm比色皿在485nm处以试剂空白作参比液测定吸光度。以铁含量（µg）为横坐标以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。3、样品测定：准确吸取样液5～10mL置于25mL容量瓶或比色管中以下按标准曲线绘制步骤进行测得吸光度从标准曲线上查出相对应的铁的含量。七、结果处理xFe(µg/100g)=——————×100m×(V1/V2)式中：x—从标准曲线上查得测定用样液相当的铁含量µgV1—测定用样液体积mLV2—样液总体积mLm—样品质量g八、说明1、加入的过硫酸钾是作为氧化剂以防止三价铁转变成二价铁。2、硫氰酸铁的稳定性差时间稍长红色会逐渐消退故应在规定时间内完成比色。3、随硫氰酸根浓度的增加Fe3+可与之形成FeCNS2+直至Fe(CNS)63-等一系列化合物溶液颜色由橙黄色至血红色影响测定因此应严格控制硫氰酸钾的用量。